P17蛋白是非洲猪瘟病毒（ASFV）主要的编码蛋白，由P17基因编码，鉴于此，科研人员利用杆状病毒表达系统表达重组ASFVP17蛋白并制备单克隆抗体，具体的操作流程为P17重组蛋白的真核表达及鉴定→小鼠免疫P17蛋白→检测P17抗体→细胞融合及筛选→单克隆抗体腹水的制备，回答下列有关问题：
（1）若P17基因序列已知，则可以通过 PCR扩增、DNA合成仪人工合成PCR扩增、DNA合成仪人工合成（答出2种）的方法获取，要检测P17基因在受体细胞中是否成功表达，在分子水平可用 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交技术鉴定。
（2）上述操作流程中“检测P17抗体”的目的是 获得产生特异性抗体的杂交细胞获得产生特异性抗体的杂交细胞，“细胞融合及筛选”中想获得 B细胞B细胞和 骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞的融合细胞，常用 灭活的病毒、聚乙二醇灭活的病毒、聚乙二醇（至少答出2种）的方法诱导细胞融合，最终筛选出的细胞是 既能无限增殖，又能产生所需抗体既能无限增殖，又能产生所需抗体，单克隆抗体除从腹水中获取外，还可通过 体外培养体外培养方法获得。
（3）单克隆抗体的优点有 特异性强、灵敏度高、可大量制备特异性强、灵敏度高、可大量制备（答出2点）。
【考点】单克隆抗体及其应用．
【答案】PCR扩增、DNA合成仪人工合成；抗原-抗体杂交；获得产生特异性抗体的杂交细胞；B细胞；骨髓瘤细胞；灭活的病毒、聚乙二醇；既能无限增殖，又能产生所需抗体；体外培养；特异性强、灵敏度高、可大量制备
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：1难度：0.7
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1．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：7引用：3难度：0.6 -
2．使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 3:30:1组卷：18引用：2难度：0.7 -
3．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5
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