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乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下：
产乳糖酶微生物L的筛选→产乳糖酶微生物L的培养→乳糖酶的提取纯化→乳糖酶的固定化
（1）表的培养液pH均为7.0，若要筛选微生物L，则不能选择表中的
ABC
ABC
培养液。

培养液乳糖乳糖酶 NaNO₂ 牛肉膏 K₂HPO₄ KCl MgS₄O•7H₂O FeSO₄

A 25g/L 1g/L 0.5g/L 1g/L 0.01g/L

B 3g/L 1g/L 0.5g/L 1g/L 0.01g/L

C 25g/L 1ug/L 3g/L 1g/L 0.5g/L 1g/L 0.01g/L

D 25g/L 3g/L 1g/L 0.5g/L 1g/L 0.01g/L

（2）为了获得能产乳糖酶的微生物L的单菌落，可采用
平板划线法或稀释涂布平板
平板划线法或稀释涂布平板
法将初筛菌液接种在固体培养基上。
（3）扩大培养微生物L时，通过不断增加营养物质的比例
不可以
不可以
（可以/不可以）提高种群密度，分析说明原因
扩大培养的液体培养基由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长
扩大培养的液体培养基由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长
。
（4）常用
物理吸附法或化学结合
物理吸附法或化学结合
法固定化乳糖酶。在建立和优化乳糖酶固定化酶柱时，优化酶反应时间可通过
控制（反应物）液体流速
控制（反应物）液体流速
来调节。
（5）如图是温度对乳糖酶的固化酶和游离酶活力的影响曲线，该曲线表明固化酶和游离酶的最适温度
相同
相同
（从相同或不同选填）；低于或高于最适温度时，固化酶的酶活力
高于
高于
（从低于、等于或高于选填）游离酶。

【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；酶的特性及应用；微生物的选择培养和计数．

【答案】ABC；平板划线法或稀释涂布平板；不可以；扩大培养的液体培养基由于营养物质浓度增高，渗透压也增高，不利于细菌生长；物理吸附法或化学结合；控制（反应物）液体流速；相同；高于

【解答】

【点评】

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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：7引用：1难度：0.7

相似题

1．丙草胺（C₁₅H₂₂ClNO₂）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（　　）

A．培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性

B．利用该方法计数结果往往比显微镜直接计数法偏小

C．以丙草胺为唯一氮源培养基进行培养可提高降解菌的浓度

D．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×10⁹个

发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7

解析

2．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或

法将初筛菌液接种在

培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）

．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的

培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少

，SM01不能很好生长
②具有

，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏

，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表试验用培养液配方

培养液阿拉伯胶阿拉伯胶酶 NaNO₃ 牛肉膏 K₂SOPO₄ MgSO₄•7H₂O KCl FeSO₄•7H₂O

A
25g/L
g/L
g/L
g/L g/L

B
25g/L
g/L
g/L
g/L
g/L
g/L
g/L

C
g/L
g/L
g/L
g/L
g/L

D
25g/L
g/L __
g/L
g/L
g/L
g/L

发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5

解析

3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到

采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过

增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO₂气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO₂的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出

的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的

特征．用高倍显微镜

（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和

直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的

；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目

．
发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
解析

培养液	乳糖	乳糖酶	NaNO₂	牛肉膏	K₂HPO₄	KCl	MgS₄O•7H₂O	FeSO₄
A	25g/L				1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B			3g/L		1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1ug/L		3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L		3g/L		1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

培养液	阿拉伯胶	阿拉伯胶酶	NaNO₃	牛肉膏	K₂SOPO₄	MgSO₄•7H₂O	KCl	FeSO₄•7H₂O
A	25g/L	__	__	__	g/L	g/L	g/L	g/L
B	25g/L	g/L	__	g/L	g/L	g/L	g/L	g/L
C	__	__	g/L	__	g/L	g/L	g/L	g/L
D	25g/L	__	g/L	__	g/L	g/L	g/L	g/L