研究人员利用小鼠的单倍体ES细胞（只有一个染色体组），成功培育出转基因小鼠。其主要技术流程如图所示，请分析回答下列问题：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四种限制酶。箭头指向的位置为限制酶的切割位置：Ampr是氨苄青霉素抗性基因，Neor是G418抗性基因。
（1）利用PCR技术可以扩增目的基因，PCR反应体系中除含绶冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有TaqDNA聚合酶TaqDNA聚合酶；引物应选用下图中的A和DA和D（填图中标号）。
（2）在基因工程操作步骤中，过程①②称为基因表达载体的构建基因表达载体的构建。已知氨苄青霉素不能有效杀死小鼠细胞，而一定浓度的G418能有效杀死不具有Neor的小鼠细胞。结合上图推测，过程①选用的2种限制酶是Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ（选填图中的编号），③处的培养液应添加G418G418（填“氨苄青霉素”或“G418”）
（3）细胞乙与受精卵受精卵类似，图中桑葚胚需通过胚胎移植胚胎移植技术移入代孕小鼠子宫内继续发育，进行该操作前需对受体小鼠进行同期发情同期发情处理。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】TaqDNA聚合酶；A和D；基因表达载体的构建；Ⅰ和Ⅱ；G418；受精卵；胚胎移植；同期发情
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：121引用：11难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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