噬菌体辅助连续进化技术（PACE）将生物分子的实验室进化与噬菌体M13的生命周期结合在一起（该噬菌体的生命周期仅为10分钟），使实验室中生物分子的进化速度提高了100倍。该技术有望让制药业使用实验室培育出来的蛋白质、核酸等成分按需制药。
噬菌体M13的增殖依赖于pⅢ蛋白。PACE技术，首先用某目的基因替换原来的pⅢ蛋白基因，构建含有目的基因的pⅢ蛋白缺陷型噬菌体（SP），然后用SP侵染培养池中的宿主E.coli（其质粒中含有与目的基因活性相关联的pⅢ蛋白基因）。SP必须进化出有效突变才能启动质粒上pⅢ蛋白基因的表达，噬菌体才能获得增殖能力并持续侵染其他宿主，从而实现连续进化（过程如图所示）。

请回答以下问题：
（1）获取目的基因后，常用

PCR

PCR

技术对其进行快速扩增。构建pⅢ蛋白缺陷型噬菌体（SP）的遗传改造过程需要用到的工具酶有

限制酶、DNA连接酶

限制酶、DNA连接酶

，SP侵染宿主E.coli的过程相当于基因工程基本操作程序中的

将目的基因导入受体细胞

将目的基因导入受体细胞

。
（2）宿主E.coli的辅助质粒（AP）包含有与目的基因活性相关联的pⅢ蛋白基因，是为了对噬菌体（SP）进行

筛选

筛选

。除此之外，AP还应包含有

启动子

启动子

才能驱动目的基因转录出mRNA。
（3）研究人员向PACE的培养池不断引流入新鲜的宿主细胞，并设置培养液流出速度稍快于宿主细胞的增殖速度，其目的是

使获得有效突变的噬菌体在培养池中富集并进行连续进化

使获得有效突变的噬菌体在培养池中富集并进行连续进化

。