原核生物繁殖快、多为单细胞,且遗传物质相对较少,因此早期的基因工程操作都用原核生物作为受体细胞,其中以大肠杆菌应用最为广泛。目前市场上供应的降血糖药物多为重组人胰岛素,即应用基因工程技术生产的、与内源激素结构和生物活性相同的胰岛素。用于生产重组人胰岛素的表达系统主要有大肠杆菌和酵母菌,这两个系统各有利弊,大肠杆菌系统表达效率高,但后处理较难;酵母系统表达量虽然低,但对表达产物的处理较简便。下图为某研究小组设计的酵母菌培养流程,回答下列有关问题:
(1)实验中对所用实验物品、培养基进行灭菌处理的目的是 防止外来杂菌污染,获得纯净培养物防止外来杂菌污染,获得纯净培养物,除上述灭菌处理外,为达到相同的目的,操作时还要注意 接种工具进行灼烧灭菌、实验操作应在酒精灯火焰附近进行、操作者的衣着和手要进行清洁和消毒等接种工具进行灼烧灭菌、实验操作应在酒精灯火焰附近进行、操作者的衣着和手要进行清洁和消毒等。
(2)用大肠杆菌来生产重组人胰岛素,为何后处理比较难?胰岛素属于分泌蛋白,分泌蛋白需要内质网和高尔基体的加工,而大肠杆菌是原核生物,原核生物没有这两种细胞器胰岛素属于分泌蛋白,分泌蛋白需要内质网和高尔基体的加工,而大肠杆菌是原核生物,原核生物没有这两种细胞器。
(3)进行酵母菌计数时,不采用平板划线法接种的原因是 划线最开始的地方菌种会长成一片,且接种菌液的体积无法确定,导致无法计数划线最开始的地方菌种会长成一片,且接种菌液的体积无法确定,导致无法计数。对于频繁使用的菌种,常采用临时保藏的方法,但该方法保存时间不长,原因是 菌种容易被污染或产生变异菌种容易被污染或产生变异。
(4)虎红培养基是培养、分离和计数酵母菌的常用培养基。在该培养基平板上,酵母菌多数为圆形凸起、边缘整齐、表面光滑湿润、不透明乳白色或粉红色的菌落,少数菌落表面粗糙或皱褶、周边呈细分枝状,因此该培养基属于 鉴别培养基鉴别培养基(填“选择培养基”或“鉴别培养基”)。观察发现,在培养基内部也分布有酵母菌菌落,分析内部出现菌落的原因为 培养基内部缺氧,但酵母菌为兼性厌氧菌,在培养基内部也能生存培养基内部缺氧,但酵母菌为兼性厌氧菌,在培养基内部也能生存。
(5)为什么要将接种后培养皿倒过来放置(倒置)?既可防止皿盖上冷凝的水滴滴入培养基造成污染;又可避免培养基表面的水分过快蒸发既可防止皿盖上冷凝的水滴滴入培养基造成污染;又可避免培养基表面的水分过快蒸发。
【答案】防止外来杂菌污染,获得纯净培养物;接种工具进行灼烧灭菌、实验操作应在酒精灯火焰附近进行、操作者的衣着和手要进行清洁和消毒等;胰岛素属于分泌蛋白,分泌蛋白需要内质网和高尔基体的加工,而大肠杆菌是原核生物,原核生物没有这两种细胞器;划线最开始的地方菌种会长成一片,且接种菌液的体积无法确定,导致无法计数;菌种容易被污染或产生变异;鉴别培养基;培养基内部缺氧,但酵母菌为兼性厌氧菌,在培养基内部也能生存;既可防止皿盖上冷凝的水滴滴入培养基造成污染;又可避免培养基表面的水分过快蒸发
【解答】
【点评】
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