我国是世界产棉大国，棉花产量占世界总产量的1/4。但是棉花病虫害非常多，尤其是虫害，直接影响了棉花的产量。转基因抗虫棉的研发成功，为棉花的增收做出了巨大的贡献。回答下列问题：
（1）转基因抗虫棉所需的杀虫基因，可用PCR技术大量扩增。扩增过程中需要将温度冷却至55～60℃，目的是 降温使两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合降温使两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合。获得大量杀虫基因后，还需利用两种酶构建基因表达载体。为了使杀虫基因和质粒能正确地成功拼接，一般操作方法是 准备两种不同的限制酶，对杀虫基因所在DNA片段和质粒均进行双酶切，再使用DNA连接酶将杀虫基因和质粒连接起来准备两种不同的限制酶，对杀虫基因所在DNA片段和质粒均进行双酶切，再使用DNA连接酶将杀虫基因和质粒连接起来。
（2）将杀虫基因导入棉花细胞有多种方法，我国独创的方法是 花粉管通道法花粉管通道法，另外还可以利用农杆菌转化法让另杀虫基因的遗传特性在棉花细胞里得以稳定维持和表达，理由是 农杆菌转化法使Ti质粒上插入了杀虫基因的的T-DNA整合到棉花细胞的染色体DNA上农杆菌转化法使Ti质粒上插入了杀虫基因的的T-DNA整合到棉花细胞的染色体DNA上。
（3）杀虫基因导入棉花细胞后，可利用放射性同位素标记的目的基因的DNA片段作为 基因探针基因探针，目的是检测 目的基因是否成功导入受体细胞目的基因是否成功导入受体细胞。若是利用抗原一抗体杂交技术，结果显示出杂交带，则说明 杀虫基因在棉花细胞中成功表达出对应蛋白质杀虫基因在棉花细胞中成功表达出对应蛋白质。
（4）除了上述的分子检测外，有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。简述在个体水平鉴定杀虫基因是否成功表达的实验思路：让害虫分别吞食转基因棉花和普通棉花的叶片，观察害虫的存活情况，如果普通棉花组害虫存活，转基因棉花组害虫死亡，则说明杀虫基因成功表达，若转基因棉花组害虫不死亡，则说明杀虫基因没有成功表达让害虫分别吞食转基因棉花和普通棉花的叶片，观察害虫的存活情况，如果普通棉花组害虫存活，转基因棉花组害虫死亡，则说明杀虫基因成功表达，若转基因棉花组害虫不死亡，则说明杀虫基因没有成功表达。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】降温使两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合；准备两种不同的限制酶，对杀虫基因所在DNA片段和质粒均进行双酶切，再使用DNA连接酶将杀虫基因和质粒连接起来；花粉管通道法；农杆菌转化法使Ti质粒上插入了杀虫基因的的T-DNA整合到棉花细胞的染色体DNA上；基因探针；目的基因是否成功导入受体细胞；杀虫基因在棉花细胞中成功表达出对应蛋白质；让害虫分别吞食转基因棉花和普通棉花的叶片，观察害虫的存活情况，如果普通棉花组害虫存活，转基因棉花组害虫死亡，则说明杀虫基因成功表达，若转基因棉花组害虫不死亡，则说明杀虫基因没有成功表达
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：6引用：1难度：0.7
相似题
-
1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
