2019-nCoV（2019新型冠状病毒）是一类具有囊膜的+RNA病毒，基因组编码多种蛋白质，其中有4种主要结构蛋白：S蛋白（刺突糖蛋白，识别宿主细胞受体的一种关键蛋白），M蛋白（膜糖蛋白），核衣壳蛋白N和小包膜蛋白E。请回答下列问题：
（1）2019-nCoV的检测可以采用实时荧光RT-PCR（逆转录聚合酶链式反应）的方法，RT-PCR的具体过程如图：
①该技术用于对微量2019-nCoV病毒的检测，可提高检测的灵敏度，过程Ⅰ需要加入适量缓冲液、模板、原料、逆（反）转录逆（反）转录酶和引物A等。
②过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要 2n-12n-1个引物B。该过程中 不是不是（填“是”或“不是”）必须有解旋酶才能解开双链DNA。
（2）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。目前科技部已经批复支持了5种疫苗的研发，S蛋白被公认为是冠状病毒疫苗研发最具希望的靶点之一。
①理论上用基因工程方法制备2019-nCoV的S蛋白（目的蛋白）时，可先经过一系列途径获取大量S基因，构建S基因表达载体时，必须使用 限制酶（限制性内切核酸酶）限制酶（限制性内切核酸酶）、DNA 连接酶DNA 连接酶两种工具酶。
②理论上可以采用细胞工程技术制备单克隆抗体，从受体细胞中分离纯化出S蛋白，将其作为 抗原抗原注入小鼠体内，从小鼠体内获取相应的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞融合后，经选择培养基筛选获得杂交瘤细胞，得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和 抗体检测（专一抗体检验阳性）抗体检测（专一抗体检验阳性），经多次筛选，可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞，进而获得抗S蛋白的单克隆抗体。
③理论上也可利用基因编辑技术将基因S导入猪体细胞中，然后通过 核移植核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。为获得更多基因编辑猪，可在胚胎移植前对胚胎进行 胚胎分割胚胎分割处理。
【考点】单克隆抗体及其应用；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】逆（反）转录；2n-1；不是；限制酶（限制性内切核酸酶）；DNA 连接酶；抗原；抗体检测（专一抗体检验阳性）；核移植；胚胎分割
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.7
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1．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：7引用：3难度：0.6 -
2．使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（ ）
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3．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5
