棉铃虫和蚜虫是常见的棉花害虫.已知基因crvIA的表达产物对棉铃虫有较强的毒性，基因gna的表达产物对蚜虫有较强的毒性。科研人员将基因cryIA与基因gna连接在一起，构建了含双抗虫基因的重组表达载体，并转入棉花细胞中，获得了具有双抗性的转基因棉花，其部分过程如图所示。请回答下列问题：
注：Klenow能将黏性末端转变为平末端；图中不同限制酶切出的黏性末端均不同。
（1）过程③中将基因cryIA与基因gna相连，可选用 T4DNA连接酶T4DNA连接酶（填“E.coliDNA连接酶”或“T4DNA连接酶”）。
（2）图中将目的基因导入棉花细胞采用了农杆菌转化法，该方法的原理是 农杆菌侵染植物细胞时能将Ti质粒上的T一DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上农杆菌侵染植物细胞时能将Ti质粒上的T一DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。
（3）已知基因cryIA的表达产物是一种毒蛋白，若要检测基因cryIA在转基因棉花中是否成功表达，常用的分子水平检测方法的基本思路是 从转基因棉花中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交从转基因棉花中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交。
（4）针对上述转基因棉花的安全性，不同的人具有不同的观点。有人认为种植了这种转基因棉花的农田中的杂草一般不会出现抗虫性状，原因可能是 不同物种之间存在生殖隔离不同物种之间存在生殖隔离，棉花很难与杂草进行杂交。为了防止抗虫基因通过花粉传播，科研小组考虑将抗虫基因导入棉花根尖细胞的 线粒体基因组线粒体基因组中，同时将抗虫棉花和普通棉花混合种植，请从生物进化的角度阐述混合种植的优点：可有效延缓害虫抗性基因频率增加的速度可有效延缓害虫抗性基因频率增加的速度。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】T4DNA连接酶；农杆菌侵染植物细胞时能将Ti质粒上的T一DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上；从转基因棉花中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原—抗体杂交；不同物种之间存在生殖隔离；线粒体基因组；可有效延缓害虫抗性基因频率增加的速度
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：4引用：1难度：0.5
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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