L-肉碱具有参与脂肪氧化、抗疲劳、延迟患阿尔茨海默综合征等功能。据报道大肠杆菌能将巴豆甜菜碱转化成L-肉碱，但效率较低。科研人员通过基因工程将BCD基因、F基因以及T基因导入到大肠杆菌细胞内以提高L-肉碱的转化率。实验过程及结果如图所示，分析并回答下列问题：
（1）实验过程中用PCR技术获得目的基因，PCR反应体系需要加入的有机物有DNA模板、dNTP、耐高温DNA聚合酶和引物引物。实验过程中不能将BCD基因、F基因以及T基因直接导入到大肠杆菌细胞内，而是构建重组质粒后再导入大肠杆菌，原因是使目的基因在受体细胞中稳定存在，能够表达使目的基因在受体细胞中稳定存在，能够表达，并能遗传给下一代。图中两个重组质粒目的基因的首端都含有启动子T7，T7是RNA聚合酶RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录。
（2）将重组所粒1和重组质粒2导入大肠杆菌时，应用Ca2+Ca2+处理大肠杆菌，使细胞处于易于吸收周围环境中DNA分子易于吸收周围环境中DNA分子的感受态。
（3）为了筛选出同时含有BCD基因、F基因以及T基因的大肠杆菌，实验的思路是在同时含有卡那霉素和氯霉素培养基上挑选单克隆大肠杆菌在同时含有卡那霉素和氯霉素培养基上挑选单克隆大肠杆菌。
（4）研究发现巴豆甜菜碱转化成L-肉碱是一个可逆反应过程，得到的工程菌在含有巴豆甜菜碱培养基中培养2小时后，L-肉碱的含量基本稳定，此时可以及时移除产物（更换培养液），使反应向生成L-肉碱的方向进行及时移除产物（更换培养液），使反应向生成L-肉碱的方向进行，以提高产量。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】引物；使目的基因在受体细胞中稳定存在，能够表达；RNA聚合酶；Ca2+；易于吸收周围环境中DNA分子；在同时含有卡那霉素和氯霉素培养基上挑选单克隆大肠杆菌；及时移除产物（更换培养液），使反应向生成L-肉碱的方向进行
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：11引用：3难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
