黄萎病是一种危害棉花种植的常见疾病，科学家通过基因工程技术将抗黄萎病基因——葡萄糖氧化酶基因（GO）导入棉花，获得抗黄萎病棉花。已知T-DNA上的基因在农杆菌中不表达，在植物细胞中可以表达。
（1）构建上图所示重组Ti质粒，需要的工具酶有 限制性核酸内切酶、DNA连接酶限制性核酸内切酶、DNA连接酶。将重组Ti质粒导入农杆菌后，将农杆菌接种到含 卡那霉素卡那霉素的LB液体培养基中振荡培养。
注：草丁磷为一种除草剂
（2）切取经无菌培养的棉花幼苗的下胚轴，直接转入菌液中侵染5～10min后，将下胚轴放入愈伤组织诱导培养基中培养2天。2天后，向培养基中加入适量 草丁磷草丁磷和青霉素，其目的分别是筛选出转化成功的棉花细胞和 抑制农杆菌生长抑制农杆菌生长。
（3）将所得愈伤组织接种到适宜培养基中培养诱导形成胚状体，在适宜人工条件下继续发育成棉花幼苗，检测棉花细胞是否合成 葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶，选出抗黄萎病棉花。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制性核酸内切酶、DNA连接酶；卡那霉素；草丁磷；抑制农杆菌生长；葡萄糖氧化酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：6引用：1难度：0.5
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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