如下是基因工程的基本操作步骤，请回答下列问题：
①目的基因的获取→②→③将目的基因导入受体细胞→④目的基因的检测与鉴定
（1）欲从一个完整的DNA中获取某目的基因，需要用到限制性核酸内切（或限制）限制性核酸内切（或限制）酶进行切割。再利用PCR技术扩增目的基因，若该目的基因扩增n代，则产生的子代DNA分子中含有新加入引物的单链有2n+1-22n+1-2条。
（2）步骤②为基因表达载体的构建基因表达载体的构建，其是基因工程的核心。若通过步骤②获得如图所示结构，其中抗氨苄青霉素基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
（3）将目的基因导入大肠杆菌，常用Ca2+处理大肠杆菌，使其成为感受态感受态细胞。采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，必须先将目的基因导入Ti质粒的T-DNA内，原因是T-DNA具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。
（4）步骤④中首先要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键，为检测目的基因在转基因生物中是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交技术。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制性核酸内切（或限制）；2n+1-2；基因表达载体的构建；鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；感受态；可转移至受体细胞并整合到受体细胞染色体的DNA上；转基因生物的DNA上是否插入了目的基因；抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：6引用：1难度：0.6
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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