如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出图中片段F已知序列两侧的未知序列，具体流程如图（以EoRI酶切为例），请据图回答下列问题：
请据图回答问题：
（1）步骤I用的EcoR I是一种 限制性核酸内切（或限制）限制性核酸内切（或限制）酶，它通过识别 双链DNA双链DNA（填“双链DNA”或“RNA”）分子的特定的核苷酸序列，并且在特定位点进行切割。
（2）步骤Ⅱ连接，用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′一羟基与5′—磷酸基团间形成 磷酸二酯键磷酸二酯键键；PCR循环中，升温到90℃以上是为了获得DNA单链，复性后延伸，延伸时TaqDNA聚合酶的作用是催化 脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键。
（3）若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ扩增，选用的PCR引物必须是 ②④②④（从引物①②③④中选择，填编号）。
| 已知序列 | DNA序列（虚线处省略了部分核酸序列） |
| PCR引物 | ①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′ ②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′ ③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′ ④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′ |
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制性核酸内切（或限制）；双链DNA；磷酸二酯键；脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键；②④
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：24引用：1难度：0.6
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