蛋白激酶是一类催化蛋白质磷酸化反应的酶，能使ATP上的磷酸基团转移并结合到蛋白质分子中某些特定氨基酸上，从而改变蛋白质的活性。在分子水平的激酶活性检测中，较为常用的方法是ADP一Glo发光法，通过检测激酶反应中生成ADP的量来反映激酶活性，该检测方法主要分为两个步骤。首先，在激酶反应后加入ADP一Glo试剂，终止激酶反应并耗尽剩余ATP；第二步，检测试剂将ADP还原成ATP，在荧光素酶的作用下，与荧光素反应发出荧光，主要过程如图所示。回答下列问题。
（1）在蛋白激酶作用下，ATP分子的 末端末端磷酸基团脱离下来与蛋白质结合。蛋白质磷酸化后活性改变，原因是 蛋白质的空间结构发生变化蛋白质的空间结构发生变化。
（2）进行检测时，先要耗尽激酶反应剩余的ATP，目的是 保证检测的ATP完全是由激酶反应生成的保证检测的ATP完全是由激酶反应生成的。根据检测结果可推测物质X是 ADP合成的ATP合成酶ADP合成的ATP合成酶，生物膜系统中存在该物质的膜结构有 线粒体内膜、叶绿体类囊体薄膜线粒体内膜、叶绿体类囊体薄膜。
（3）ADP-Glo发光法可通过荧光信号的强度反映激酶活性，原理是 激酶反应中生成ADP的量可反映激酶活性，检测试剂可将这些ADP转化为ATP，ATP与荧光素反应最终发出荧光，所以荧光信号强度与激酶活性呈正相关激酶反应中生成ADP的量可反映激酶活性，检测试剂可将这些ADP转化为ATP，ATP与荧光素反应最终发出荧光，所以荧光信号强度与激酶活性呈正相关。
（4）有人提出：一定浓度的Hg2+会导致蛋白激酶失活。请设计实验对该观点进行验证，实验思路是 将一定量的蛋白激酶均分为两组，一组用一定浓度的Hg2+处理，另一组不处理。激酶反应一段时间后，检测两组蛋白激酶的活性将一定量的蛋白激酶均分为两组，一组用一定浓度的Hg2+处理，另一组不处理。激酶反应一段时间后，检测两组蛋白激酶的活性。
【答案】末端；蛋白质的空间结构发生变化；保证检测的ATP完全是由激酶反应生成的；ADP合成的ATP合成酶；线粒体内膜、叶绿体类囊体薄膜；激酶反应中生成ADP的量可反映激酶活性，检测试剂可将这些ADP转化为ATP，ATP与荧光素反应最终发出荧光，所以荧光信号强度与激酶活性呈正相关；将一定量的蛋白激酶均分为两组，一组用一定浓度的Hg2+处理，另一组不处理。激酶反应一段时间后，检测两组蛋白激酶的活性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：21引用：2难度：0.7
