MAP30蛋白是一种能使Ⅰ型核酸核糖体失活的蛋白质,存在于苦瓜果实和种子中。实验表明,MAP30蛋白具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒等功能,近年来引起人们的广泛关注。现有一科研团队欲培育高效表达该基因的马铃薯新品种。请回答下列问题。
(1)获取MAP30蛋白基因,人们可从 苦瓜果实或种子苦瓜果实或种子提取mRNA,再进行逆转录获得。这样得到的基因和从基因组文库中获取的基因的区别主要是其不含 内含子、启动子、终止子等内含子、启动子、终止子等。
(2)获得目的基因后可利用PCR技术对其进行扩增,所用的缓冲液中除目的基因外,还应包括 4种脱氧(核糖)核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)4种脱氧(核糖)核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)等物质。
(3)构建基因表达载体时,人们常常分别使用两种限制酶剪切目的基因和运载体,这样做是为了避免出现 目的基因自我环化、目的基因在运载体上反向连接目的基因自我环化、目的基因在运载体上反向连接。
(4)将基因表达载体导入马铃薯受体细胞后,可用 植物组织培养植物组织培养技术得到转基因幼苗。检测MAP30的基因是否成功表达,可用 抗原—抗体杂交抗原—抗体杂交技术。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】苦瓜果实或种子;内含子、启动子、终止子等;4种脱氧(核糖)核苷酸、引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶);目的基因自我环化、目的基因在运载体上反向连接;植物组织培养;抗原—抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:4引用:2难度:0.7
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