转基因技术可以使重组生物增加人们所期望的新性状，培育出新品种，如图是基因工程操作流程图，请根据图示回答下列问题：

（1）获取序列未知的目的基因，常用的方法是从

基因文库

基因文库

中提取，①过程中常用的酶有

限制酶和DNA连接酶

限制酶和DNA连接酶

。
（2）若要通过工程菌获得人类胰岛素，②过程中常用氯化钙处理大肠杆菌，其目的是

使大肠杆菌成为感受态细胞

使大肠杆菌成为感受态细胞

。为了检测目的基因是否成功表达出胰岛素，需要采用的方法有

抗原-抗体杂交技术

抗原-抗体杂交技术

。
（3）在培育转基因抗冻番茄时，将离体番茄叶组织经脱分化形成愈伤组织，再通过

液体悬浮

液体悬浮

培养得到单细胞，将外源基因导入其中并培育形成抗冻番茄植株，过程④中用到的植物细胞 工程技术是

植物组织培养

植物组织培养

。
（4）若要培育能生产彩色羊毛的转基因羊，则需将转基因的受体细胞培养到早期胚胎后，再通过

胚胎移植

胚胎移植

过程形成转基因羊。