白羊草是一种耐旱的优良草本植物。研究人员提取白羊草细胞中的M基因，将其转入拟南芥细胞中，以研究白羊草的M基因与抗旱性的相关性。请回答下列问题：
（1）利用PCR技术获得M基因，需要在PCR反应体系中加入模板、引物及 热稳定DNA聚合酶（Taq酶）和原料（dNTP）热稳定DNA聚合酶（Taq酶）和原料（dNTP）；若模板双链DNA的数量为a个，经过35个循环需要消耗引物的数量是 a×（236-2）a×（236-2）。
（2）下面是对M基因进行PCR扩增时用到的两种引物：
引物1：5'-ACGGTGCATTTTCATCGTCTCT-3'
引物2：5'-AGAGACGATGTTGCTTCCTCTA-3'
如图1表示含有M基因的DNA片段，①②③④表示引物可能的结合位点。
下列选项中，引物1和引物2结合的正确位置是 DD。
A．引物1结合在②，引物2结合在③
B．引物1结合在④，引物2结合在①
C．引物1结合在③，引物2结合在②
D．引物1结合在①，引物2结合在④
（3）研究人员选择如图2质粒作为运载体时，最好同时使用两种限制酶切割质粒，并且两种限制酶中不能用限制酶 II，原因是 因为限制酶I存在于四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因这两种标记基因内部，若使用限制酶I会将两种标记基因都破坏因为限制酶I存在于四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因这两种标记基因内部，若使用限制酶I会将两种标记基因都破坏。
（4）研究人员想要进一步确定白羊草的M基因与其抗旱性是否有关，请以转基因拟南芥、野生型拟南芥为实验材料，写出简要的设计思路：将抗旱转基因拟南芥和野生型拟南芥置于干旱的环境培养将抗旱转基因拟南芥和野生型拟南芥置于干旱的环境培养，若 若抗旱转基因拟南芥在干旱环境中的生长状况优于野生型拟南芥若抗旱转基因拟南芥在干旱环境中的生长状况优于野生型拟南芥，则说明M基因与白羊草的抗旱性有关。
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】热稳定DNA聚合酶（Taq酶）和原料（dNTP）；a×（236-2）；D；I；因为限制酶I存在于四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因这两种标记基因内部，若使用限制酶I会将两种标记基因都破坏；将抗旱转基因拟南芥和野生型拟南芥置于干旱的环境培养；若抗旱转基因拟南芥在干旱环境中的生长状况优于野生型拟南芥
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：23引用：2难度：0.5
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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