IL-6（白细胞介素6）在体内过量表达会引发多种免疫性疾病。在免疫疗法中，利用人源IL-6抗体结合过量的IL-6进行治疗比使用鼠源IL-6单抗效果更好、风险更小。科研人员利用农杆菌转化法将人源IL-6抗体基因转入某种植物中并成功表达。回答下列问题：
（1）将IL-6注射到小鼠体内，取小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出 能产生特异性IL-6抗体的杂交瘤细胞能产生特异性IL-6抗体的杂交瘤细胞进行扩大培养，可规模化生产鼠源IL-6抗体。与人源抗体相比，前者在实际应用中除了可能因免疫排斥导致效果较差外，还可能具有的潜在风险是 引起过敏反应引起过敏反应。
（2）用限制性内切核酸酶和DNA连接酶处理人源IL-6抗体基因与 Ti质粒Ti质粒，构建表达载体，再将其与经 Ca2+Ca2+处理的农杆菌共培养。培养农杆菌的培养基成分通常包括蛋白胨、酵母浸出液、无机盐和水，其中蛋白胨可以为农杆菌提供哪些营养成分 ABDABD。
A．碳源
B．氮源
C．抗生素
D．维生素
（3）利用筛选后的农杆菌感染植物愈伤组织后，将愈伤组织置于含有抗生素的培养基中继续培养，抗生素的作用是筛选转化成功的愈伤组织细胞及 杀灭农杆菌杀灭农杆菌。在适宜配比的激素诱导下，细胞不断分裂，并经 再分化再分化过程形成胚状体，继续发育形成试管苗。试管苗移栽到土壤前，通常需在经 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌的珍珠岩或蛭石中进行炼苗。
（4）利用凝胶电泳和分子杂交技术检测人源IL-6抗体基因是否成功表达。完善以下实验思路：
①将幼苗叶片液氮冷冻并 研磨研磨，用苯酚法提取叶片总蛋白，制成样品。
②将 凝胶凝胶置于缓冲溶液中，再向加样孔中加入蛋白样品，由于人源IL-6抗体是酸性蛋白质，所以加样孔应朝向 负负极。
③电泳分离结束，转移到PVDF膜上，利用 抗原—抗体分子杂交抗原—抗体分子杂交技术进行检测。
（5）在利用植物体作为生物反应器进行人源IL-6抗体规模化生产前，除对表达剂量进行检测外，还需要对抗体的 活性活性进行检测。进一步研究发现，转基因植物叶片中人源IL-6抗体表达水平较低，这与植物叶肉细胞中基因X的表达有关。可采取基因敲除技术将neo基因定向插入到基因X中，使其表达失活。在使用PCR检测基因X是否被敲除时，至少一侧的引物需要根据 neo基因neo基因的碱基序列设计。
【答案】能产生特异性IL-6抗体的杂交瘤细胞；引起过敏反应；Ti质粒；Ca2+；ABD；杀灭农杆菌；再分化；高压蒸汽灭菌；研磨；凝胶；负；抗原—抗体分子杂交；活性；neo基因
【解答】
【点评】
声明：本试题解析著作权属菁优网所有，未经书面同意，不得复制发布。
发布：2024/6/27 10:35:59组卷：30引用：2难度：0.7
相似题
-
1．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：7引用：3难度：0.6 -
2．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5 -
3．使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 3:30:1组卷：18引用：2难度：0.7
