人参是一种名贵药材，具有良好的滋补作用，干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治疗中有一定疗效。如图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①～④表示相关的操作，EcoRⅠ、BamHⅠ为限制酶，它们的识别序列及切割位点如表所示。
| 限制酶 | 识别序列和切割位点 |
| EcoRⅠ | G↓AATTC |
| BamHⅠ | G↓GATCC |
请分析回答：
（1）步骤①利用PCR技术扩增干扰素基因时，首先根据
干扰素基因两端的部分核苷酸序列
干扰素基因两端的部分核苷酸序列
设计并合成引物；同时为了方便后续的剪切和连接，还应在两种引物的一端分别加上 GAATTC和GGATCC
GAATTC和GGATCC
序列。（2）步骤②基因表达载体的构建是基因工程的核心，启动子的作用机理为
能与RNA聚合酶特异性结合并使其活化驱动基因转录过程
能与RNA聚合酶特异性结合并使其活化驱动基因转录过程
，启动子的上游还必须拥有的DNA片段是 复制原点
复制原点
。（3）过程③中T-DNA
不能
不能
（填“能”或“不能”）整合到受体细胞的染色体DNA上，原因是 该受体细胞为根瘤农杆菌细胞，是原核生物，无染色体
该受体细胞为根瘤农杆菌细胞，是原核生物，无染色体
。过程④可利用 抗原—抗体杂交
抗原—抗体杂交
法进行检测和筛选。（4）上述将人的干扰素基因导入到人参的愈伤组织细胞中仍然可以成功表达出人的干扰素分子，其原因是
生物界共用一套遗传密码
生物界共用一套遗传密码
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】干扰素基因两端的部分核苷酸序列；GAATTC和GGATCC；能与RNA聚合酶特异性结合并使其活化驱动基因转录过程；复制原点；不能；该受体细胞为根瘤农杆菌细胞，是原核生物，无染色体；抗原—抗体杂交；生物界共用一套遗传密码
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：24引用：1难度：0.7
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
