CAR—T细胞疗法是通过设计CAR基因，并导入癌症患者的T细胞中，使其转化为CAR-T细胞，CAR-T细胞膜上的CAR蛋白与癌细胞表面抗原特异结合后，激活CAR-T细胞使其增殖、分化，从而实现对癌细胞的特异性杀伤和记忆，主要过程如下图。
请回答：
（1）要获取CAR基因，可采取PCR技术进行大量扩增，前提是 CAR基因序列已知CAR基因序列已知。
（2）连接形成pCDH—CAR上除了目的基因外，还有一些必须的部分，比如启动子和终止子，其中启动子是 RNA聚合酶RNA聚合酶识别结合位点。
（3）完成过程②常用方法是 显微注射显微注射法。此外，还可以先将CAR基因整合到逆转录病毒载体中，将CAR基因整合到T细胞的 染色体DNA染色体DNA上。
（4）检测CAR-T细胞中的CAR基因是否表达了所采用的方法是 抗原-抗体杂交技术抗原-抗体杂交技术。
（5）在将CAR-T细胞输给病人进行治疗之前，还需在实验室内进行细胞扩增培养。体外培养CAR-T细胞的培养液中除合成培养基的成分外，一般还需添加 动物血清动物血清等天然成分。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】CAR基因序列已知；RNA聚合酶；显微注射；染色体DNA；抗原-抗体杂交技术；动物血清
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/21 8:0:10组卷：1引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
