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线虫是一种危害极大的植物病原生物,给农业生产带来巨大危害。相比于物理防治和化学防治,生物防治有不易使线虫产生抗性及生态安全等明显优势,近年来逐渐成为研究热点。放线菌在自然界中分布广泛,其可以产生多种具有生物活性的次级代谢产物——抗生素。杀线虫农用抗生素就是由放线菌发酵产生的。云南轿子山土壤类型丰富,原生植被类型多样,是放线菌资源筛选的理想生境。以下是某科研团队对
放线菌的采集和分离过程,请回答问题:
(1)该团队在轿子山不同位置采集得到90份土样,应盛放于
灭菌
灭菌
处理过的信封中带回以待分离。
(2)培养基制备:采用改良酵母膏一麦芽汁液体培养基进行放线菌发酵液制备。培养基配方中除了主要成分(如酵母膏、麦芽膏、胰蛋白胨)外,还应添加
水、无机盐、特殊营养物质
水、无机盐、特殊营养物质

(3)放线菌分离:称取每份土样,自然风干并干热处理,加入装有无菌水的三角瓶中摇床振荡培养得到土壤悬液。振荡培养的原因是
增加溶氧量;使菌体与营养物质充分接触
增加溶氧量;使菌体与营养物质充分接触
。菌种纯化方法如图,为
稀释涂布平板
稀释涂布平板
法。统计的菌落数往往比活菌实际数目低,原因是
两个或多个细胞连在一起形成一个菌落
两个或多个细胞连在一起形成一个菌落

(4)杀线虫活性放线菌筛选:将分离纯化的各组放线菌分别接种于含有线虫的液体培养基中,定期镜检,记录各组线虫死亡情况。结果如下表:
菌株编号 线虫致死率(%)
KC47 54.0
KC62 64.0
KC7 90.0
KC113 87.0
KC135 67.0
为提高实验的严谨性,应设置对照组,对照组的处理为
将等量的无菌水接种于含有线虫的液体培养基中
将等量的无菌水接种于含有线虫的液体培养基中
。根据实验结果,应选用菌株
KC7
KC7
(填菌株编号)作为目的菌株扩大培养,并使用
甘油管藏
甘油管藏
法长期保存。

【答案】灭菌;水、无机盐、特殊营养物质;增加溶氧量;使菌体与营养物质充分接触;稀释涂布平板;两个或多个细胞连在一起形成一个菌落;将等量的无菌水接种于含有线虫的液体培养基中;KC7;甘油管藏
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:29引用:3难度:0.7
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