CRISPRCas9基因编辑技术荣获2020年度诺贝尔化学奖，其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割（如图所示）。请回答下列问题：
（1）Cas9蛋白借助向导RNA对目标DNA分子进行精准定位，依赖于识别序列与目标DNA之间的碱基互补配对识别序列与目标DNA之间的碱基互补配对；对目标位点进行准确切割，依赖于核酸内切酶Cas9具有专一性核酸内切酶Cas9具有专一性。在使用Cas9蛋白对不同目标DNA进行编辑时，应使用Cas9蛋白和不同不同（填“相同”或“不同”）的向导RNA进行基因编辑。将切下的基因片段与另一段DNA进行拼接时，需要用到DNA连接DNA连接酶。
（2）在设计向导RNA识别序列时，若目标DNA的a链切点附近序列为…TCCAGAATC…则向导RNA上识别序列为……UCCAGAAUC…………UCCAGAAUC……，向导RNA双链区和识别序列的杂合区，二者相同的碱基配对方式有A与U、G与CA与U、G与C，后者特有的碱基配对方式有A与TA与T。
（3）CRISPR/Cas9基因编辑技术具有广泛的应用，如遗传病的治疗、癌症的治疗、动植物的育种、获取目的基因等遗传病的治疗、癌症的治疗、动植物的育种、获取目的基因等（答出 1 点即可）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】识别序列与目标DNA之间的碱基互补配对；核酸内切酶Cas9具有专一性；不同；DNA连接；……UCCAGAAUC……；A与U、G与C；A与T；遗传病的治疗、癌症的治疗、动植物的育种、获取目的基因等
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：9引用：2难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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