养殖家禽的饲料中富含谷物，纤维素是谷物的重要成分，但家禽消化道中缺少能降解纤维素的酶，阻碍了家禽对饲料的吸收与利用。研究人员利用转基因技术改造乳酸杆菌，将其添加于饲料中，以提高家禽养殖效率。
（1）枯草芽孢杆菌分泌可降解纤维素的一种酶，这种酶由W基因编码。为在乳酸杆菌中表达W基因，需使用图1中质粒为载体。图2为克隆得到的含W基因的DNA片段，W基因以乙链为转录模板链，转录时mRNA自身延伸的方向为5'→3'。
①很多启动子具有物种特异性，在图1质粒中插入W基因，其上游启动子应选择 BB（填正确选项前字母）。
A.枯草芽孢杆菌启动子
B.乳酸杆菌启动子
C.农杆菌启动子
②下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1.图2中标注了相关限制酶的酶切位点。
| 限制酶 | EcoRI | BamH I | KpnI | Mfe I | HindIII |
| 识别序列及切割位点 |
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MfeⅠ、HindⅢ
MfeⅠ、HindⅢ
切割图1中质粒，使用限制酶 EcoRⅠ、HindⅢ
EcoRⅠ、HindⅢ
切割图2中含W基因的DNA片段，以获得能正确表达W基因的重组质粒。所得重组质粒转化乳酸杆菌后，使用含抗生素 氨苄青霉素
氨苄青霉素
的培养基筛选，以得到转入W基因的乳酸杆菌。（2）为确定导入重组质粒的乳酸杆菌是否具有分解纤维素的能力，研究人员用液体培养基分别培养如表所示菌种。所得部分菌液接种于固体鉴定培养基上，另取部分菌液上清液测定酶活力，实验方案及测定结果如表所示。
| 菌种 | 酶活性相对值 |
| 乳酸杆菌 | 未检出 |
| X | 未检出 |
| 导入了重组质粒的乳酸杆菌 | 0.96 |
导入空质粒（或“空载体”）的乳酸杆菌
导入空质粒（或“空载体”）的乳酸杆菌
。若要检测导入重组质粒的乳酸杆菌是否合成了纤维素酶的方法是 抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交
。（3）解决谷物中纤维素难以被消化吸收的另一思路是将W基因转入家禽中，使转基因家禽消化道特异表达能够降解纤维素的酶。采用显微注射的方法将重组质粒导入
（家禽）受精卵
（家禽）受精卵
细胞中，上述研究方法与该思路相比，有哪些优点 家禽转基因难度大，成本高，且通过家禽转基因只能改造一种家禽，本实验通过饲料添加转基因乳酸杆菌可满足各种家禽需要；转基因家禽可能存在食物安全性问题，将转基因乳酸杆菌加入饲料比较安全；转基因乳酸杆菌易扩大培养，生产成本低
家禽转基因难度大，成本高，且通过家禽转基因只能改造一种家禽，本实验通过饲料添加转基因乳酸杆菌可满足各种家禽需要；转基因家禽可能存在食物安全性问题，将转基因乳酸杆菌加入饲料比较安全；转基因乳酸杆菌易扩大培养，生产成本低
（写出2点）。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】B；MfeⅠ、HindⅢ；EcoRⅠ、HindⅢ；氨苄青霉素；导入空质粒（或“空载体”）的乳酸杆菌；抗原-抗体杂交；（家禽）受精卵；家禽转基因难度大，成本高，且通过家禽转基因只能改造一种家禽，本实验通过饲料添加转基因乳酸杆菌可满足各种家禽需要；转基因家禽可能存在食物安全性问题，将转基因乳酸杆菌加入饲料比较安全；转基因乳酸杆菌易扩大培养，生产成本低
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：29引用：1难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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