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镰孢菌引起的小麦赤霉病被称为小麦“游症”,是威胁粮食安全的重大国际性难题。我国科学家从小麦近缘属植物长穗偃麦草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7(编码一种谷胱甘肽S-转移酶),为解决小麦赤霉病的世界性难题提供了“金钥匙”。研究发现,用光诱导型启动子(PrbcS)能够使Fhb7基因表达,其结合T基因后能使Fhb7基因更高水平表达。
(1)PrbcS是一段有特殊结构的DNA片段,能被
RNA聚合酶
RNA聚合酶
识别并结合,驱动基因的持续
转录
转录
过程。
(2)通过PCR技术扩增Fhb7基因片段,反应过程一般由95℃热变性、55~60℃引物和模板配对、72℃延伸三个步骤,经过多次循环完成。延伸阶段选用72℃而非95℃综合考虑了两个因素,这两个因素是
防止DNA变性
防止DNA变性
保持Taq酶活性所需温度条件
保持Taq酶活性所需温度条件

(3)图中甲、乙均为Fhb7基因表达载体构建过程中的中间载体,请分析重组载体丙的部分构建过程。区别含有中间载体甲与含有重组载体丙的微生物的方法是
用含有卡那霉素的培养基培养
用含有卡那霉素的培养基培养
。经酶切后凝胶电泳,测得含2B基因片段长度为0.3kb,经图示信息分析,含光诱导型启动子-T基因的片段长度约为
1.8kb
1.8kb
。据图分析,形成重组载体丙,需要使用限制酶
HindШ和NotⅠ
HindШ和NotⅠ
切割中间载体甲和乙,图中重组载体丙问号处有
6
6
种限制酶的酶切位点。

(注:图中单词代表限制酶酶切位点)

【答案】RNA聚合酶;转录;防止DNA变性;保持Taq酶活性所需温度条件;用含有卡那霉素的培养基培养;1.8kb;HindШ和NotⅠ;6
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:29引用:2难度:0.6
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    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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