绞股蓝又名七叶胆,是一种含有中草药成分的天然植物。具有清心提神、抗疲劳、清热解毒、祛痰止咳、降低胆固醇和血脂等功效。不仅如此、绞股蓝细胞中还含有抗烟草花叶病毒(TMV)的基因,可以合成一种抗TMV蛋白,使其叶片对TMV具有抗感染特性。烟草是具有经济价值的双子叶植物,TMV的感染会导致烟草大幅度减产。科研人员利用基因工程技术培育出了抗TMV的烟草。主要流程如图所示。
(1)从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因。图中①过程需要反(逆)转录反(逆)转录酶。在体外通过PCR扩增PCR扩增技术可以获得较多的目的基因。
(2)图中能体现基因工程核心的是③③过程(用图中的数字表示),该过程要用到的酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶限制性核酸内切酶和DNA连接酶。
(3)④过程表示将重组Ti质粒导入烟草体细胞,常用方法是农杆菌转化法农杆菌转化法。
(4)由图分析,在③过程构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是卡那霉素抗性卡那霉素抗性基因。
(5)⑤过程中,烟草体细胞经过脱分化脱分化形成愈伤组织,然后经过再分化形成再生植株。
(6)在个体水平上检验获得的烟草能否抗TMV的方法是用TMV感染烟草,观察烟草是否出现患病症状用TMV感染烟草,观察烟草是否出现患病症状。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】反(逆)转录;PCR扩增;③;限制性核酸内切酶和DNA连接酶;农杆菌转化法;卡那霉素抗性;脱分化;用TMV感染烟草,观察烟草是否出现患病症状
【解答】
【点评】
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