Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗,其技术流程如图(图中数字序号表示的是相关过程)。请回答:

(1)过程①将进行培养的上皮细胞注入去核的卵母细胞中,接受细胞核的卵母细胞应处于MⅡ中MⅡ中时期,去除卵母细胞细胞核的目的是使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。
(2)过程②利用的技术是早期胚胎培养早期胚胎培养,当重组胚胎培养到囊胚期时,可从其内细胞团内细胞团分离出ES细胞,ES细胞在功能上具有发育的全能性发育的全能性的特点。
(3)过程③中获取的目的基因是(正常的)Rag2基因(正常的)Rag2基因,若要将目的基因导入受体细胞,需要构建含(正常的)Rag2基因的基因表达载体(正常的)含(正常的)Rag2基因的基因表达载体(正常的),构建之前可以根据Rag2基因的脱氧核苷酸序列(或碱基对序列或遗传信息)Rag2基因的脱氧核苷酸序列(或碱基对序列或遗传信息)设计引物,利用PCR技术对目的基因进行扩增。将基因导入ES细胞的方法通常是显微注射显微注射法,为了检测ES细胞的DNA上是否插入了干扰素基因,可采用DNA分子杂交DNA分子杂交技术。
(4)按此方法和图示技术流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和胰蛋白酶限制性核酸内切酶、DNA连接酶和胰蛋白酶和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。通测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag2蛋白的抗体抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。
【考点】动物细胞核移植技术.
【答案】MⅡ中;使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞;早期胚胎培养;内细胞团;发育的全能性;(正常的)Rag2基因;含(正常的)Rag2基因的基因表达载体(正常的);Rag2基因的脱氧核苷酸序列(或碱基对序列或遗传信息);显微注射;DNA分子杂交;限制性核酸内切酶、DNA连接酶和胰蛋白酶;抗Rag2蛋白的抗体
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:228引用:5难度:0.3