基因工程可以按照人们的意愿赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，下图1是基因工程的基本操作流程。近十年来，PCR技术（多聚酶链式反应）成为分子生物学实验室里的一种常规手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制（如图2），在很短的时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，使实验所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。请据图回答下列问题：
（1）图1中①过程所需的酶是 逆转录酶逆转录酶②过程所需的酶是 限制性内切核酸酶限制性内切核酸酶。
（2）若图1中④过程为将目的基因导入植物细胞，最常用的方法是 农杆菌转化法农杆菌转化法。
（3）图1中⑤过程是 目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定，要检测目的基因是否成功表达，首先从转基因生物个体中提取蛋白质，用相应的抗体进行 抗原—抗体抗原—抗体杂交。
（4）图2中加热94℃目的是打开 氢氢键，这一步称为变性。当温度降低时，引物与模板 3'3'端结合，在DNA聚合酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成两个DNA分子。
（5）图2中PCR技术的必要条件，除了模板、原料、ATP、酶以外，至少还需要三个条件，即：液体环境、适宜的温度和 酸碱度酸碱度，前者由PCR仪自动调控，后者则靠 缓冲液缓冲液来维持。
（6）DNA的复制需要引物，其主要原因是 DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。退火温度的设置跟引物有关，若 引物中GC含量高引物中GC含量高，退高温度可以高点；若退火温度太低，会造成引物的特异性下降，不但会造成非目标DNA片段多，而且会出现无序扩增。
（7）科研人员利用PCR技术大量扩增其染色体上的16SrRNA保守片段，然后通过DNA序列比对进行菌种亲源关系的鉴定。查找数据库发现该放线菌的16SrRNA目的基因片段及相应限制酶识别序列如图所示：
为了获得目的基因16SrRNA，需要使用的限制酶是 EcoRIEcoRI和 SacISacI。得到目的基因以后就可以利用PCR技术对16SrRNA进行体外扩增，此过程需要加入 Taq酶Taq酶催化。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】逆转录酶；限制性内切核酸酶；农杆菌转化法；目的基因的检测与鉴定；抗原—抗体；氢；3'；酸碱度；缓冲液；DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链；引物中GC含量高；EcoRI；SacI；Taq酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：15引用：2难度：0.6
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
2．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
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