诺如病毒是一种单链RNA 病毒，可引起流行性急性肠胃炎的重要病原体。诺如病毒衣壳P蛋白上含有抗原位点和受体识别位点，在体外可单独表达，被用于疫苗的免疫实验研究。

（1）人体感染诺如病毒后，会引发

特异性免疫（体液免疫）

特异性免疫（体液免疫）

免疫，在康复者血清中能够检测到

抗体

抗体

（物质）。有研究表明感染后第 180 天记忆B细胞仍具有持久性，说明这些细胞对机体具有

潜在的长期保护（预防再次感染）

潜在的长期保护（预防再次感染）

作用。
（2）研究人员希望借P蛋白治疗由β蛋白沉积导致的阿尔茨海默症，选取β蛋白作为免疫原，利用诺如病毒P颗粒作为疫苗载体，研究其免疫原性。研究人员将β蛋白基因插入P蛋白基因的恰当位置，制备了重组P蛋白基因P-β（1780bp）后，采用双酶切方法，通过NdeⅠ和XhoⅠ酶和pET载体质粒（5230bp）构建重组质粒pET-P-β，如图1．对照组应选用

②③

②③

。（多选，填写各项目前的序号。）
①诺如病毒RNA
②P蛋白基因与pET载体质粒构建的重组质粒pET-P
③pET载体质粒
（3）为了鉴定重组质粒pET-P-β是否构建成功，NdeⅠ和XhoⅠ酶分别对重组质粒pET-P-β和pET载体质粒进行酶切，然后酶切片段和重组P蛋白基因进行电泳，请将你判断的电泳结果画到表中对应的泳道上。

DNA标记	P-β	pET	pET-P-β

（4）想要获得目的蛋白，需要将构建的重组质粒pET-P-β、pET-P和pET分别转入用

Ca²⁺（CaCl₂）

Ca²⁺（CaCl₂）

处理的成为感受态的大肠杆菌细胞，培养处理后提取蛋白质。过程如下：
若干健康小鼠随机分为3组，将提取的蛋白质分别溶于PBS缓冲液，对小鼠进行皮下免疫，并对4次免疫后的血清进行不同梯度稀释，用

β蛋白

β蛋白

（β蛋白/P蛋白）作为抗原，通过免疫法检测重组P-β蛋白的免疫原性。如图2所示，请据图描述出能够表明P-β蛋白可以在小鼠体内引起免疫反应，具有特异的免疫原性的实验结果。