图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒PO具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：
（1）用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。线性载体P1经酶处理，在其两端各添加了一个 胸腺嘧啶胸腺嘧啶，形成线性载体P2。
（2）为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C三类菌落，其生长情况如下表（“+”代表生长，“-”代表不生长）。根据表中结果判断，应选择的菌落是 BB（填表中字母）类，另外两类菌落质粒导入情况分别是 A类菌落含有P0、C类菌落未转入质粒A类菌落含有P0、C类菌落未转入质粒。
| 菌落类型 平板类型 |
A | B | C |
| 无抗生素 | + | + | + |
| 氨苄青霉素 | + | + | - |
| 四环素 | + | - | - |
| 氨苄青霉素+四环素 | + | - | - |
乙和丙
乙和丙
。小明同学用图中某对引物从一个菌落的质粒中扩增出了400bp片段，请分析出现这种结果的原因：目的基因反向连接
目的基因反向连接
。【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】胸腺嘧啶；B；A类菌落含有P0、C类菌落未转入质粒；乙和丙；目的基因反向连接
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：10引用：1难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
