异丁醇被视为一种高性能生物燃料。某些蛋白如BmoR通常可以灵敏地响应异丁醇浓度的变化，二者结合后，可以调控相关基因表达，因此可以用作生物传感器。科研人员将BmoR基因和荧光蛋白GFP基因导入大肠杆菌，以筛选异丁醇高产菌株。
（1）将目的基因导入大肠杆菌，构建的基因表达载体应具备 启动子、终止子、标记基因、复制原点启动子、终止子、标记基因、复制原点等结构，以便目的基因能正常表达。在合适培养基中培养大肠杆菌，培养基除了必备的营养物质外，还需要满足生物对 氧气、pH、特殊营养物质氧气、pH、特殊营养物质（答出2点即可）等环境因素的需求。
（2）经检测大肠杆菌GFP荧光强度与异丁醇浓度的关系如图1。推测，通过检测大肠杆菌GFP荧光强度可筛选异丁醇高产菌株的原理是 BmoR蛋白与异丁醇结合后，促进荧光蛋白GFP基因的表达；GFP荧光强度越强，说明异丁醇的浓度越高BmoR蛋白与异丁醇结合后，促进荧光蛋白GFP基因的表达；GFP荧光强度越强，说明异丁醇的浓度越高。
（3）据图，异丁醇浓度超过 2020mM筛选效果不理想。因此该课题组利用蛋白质工程技术对BmoR进行改造：从 BmoR的功能BmoR的功能出发，设计蛋白质的空间结构，推测出该有的氨基酸序列，再依据 中心法则中心法则推测出BmoR基因的核苷酸序列，进而改造BmoR基因。
（4）科研人员对改造后的基因进行PCR扩增，以便进行检测鉴定。用引物1、4进行PCR扩增，由于一些引物可能结合到错误位置而扩增出随机产物，导致PCR扩增过程有一定的错误率。因此可在原有扩增产物中加入引物2、3再进行PCR扩增，以提高正确产物的纯度，理由是 正确产物上才有与引物2、3特异性结合的序列，因此引物2和3只能对正确产物进行PCR扩增，而随机产物无法扩增正确产物上才有与引物2、3特异性结合的序列，因此引物2和3只能对正确产物进行PCR扩增，而随机产物无法扩增。
【答案】启动子、终止子、标记基因、复制原点；氧气、pH、特殊营养物质；BmoR蛋白与异丁醇结合后，促进荧光蛋白GFP基因的表达；GFP荧光强度越强，说明异丁醇的浓度越高；20；BmoR的功能；中心法则；正确产物上才有与引物2、3特异性结合的序列，因此引物2和3只能对正确产物进行PCR扩增，而随机产物无法扩增
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：29引用：4难度：0.5
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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