研究发现物质M与肝细胞膜上R蛋白结合可促进某动物肝脏细胞的增殖,设计实验验证该发现。实验材料与用具:正常肝脏细胞、R蛋白基因敲除的肝脏细胞(R蛋白基因敲除的肝脏细胞增殖能力有所降低)、M物质溶液、培养液、血细胞计数板、显微镜及其他用具)。
(说明:不考虑加入M后的体积变化,M与R蛋白不结合时对细胞无影响。所有肝脏细胞均具有分裂能力,只进行原代培养。)
(1)实验思路:取培养瓶若干个,分组并编号如下:
A、C组:等量适量的细胞培养液+等量适量的正常肝脏细胞
B、D组;等量的细胞培养液+R蛋白基因敲除的肝脏细胞R蛋白基因敲除的肝脏细胞
①各组样品在CO2培养箱中培养,每隔6小时各取其中的几个样品,用血细胞计数板计数用血细胞计数板计数并记录。
②培养12小时后,在A、B两组中分别加入等量适量的 M物质溶液M物质溶液。
③重复步骤①
④24小时后结束实验,统计分析数据。
(2)请用曲线图预测实验结果(要求:注明加入物质M的时间) 
。
(3)分析讨论:
①由于动物细胞培养时贴壁生长难以形成细胞悬液,所以需加入 胰蛋白酶胰蛋白酶,并摇匀后再测定相关数据。
②物质M能与R蛋白特异性结合,与R蛋白的 空间结构空间结构有关。
③M物质发挥作用的过程 能能(填“能”或“不能”)体现细胞膜的选择透过性。


【考点】动物细胞培养的条件与过程.
【答案】R蛋白基因敲除的肝脏细胞;用血细胞计数板计数;M物质溶液;
;胰蛋白酶;空间结构;能

【解答】
【点评】
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