漆酶降解木质素能力较强,在纸浆生物漂白、废水处理、苯氧基类除草剂去毒等领域具有广泛的研究和应用价值。实际应用于生产的漆酶主要来源于白腐真菌,从白腐真菌中筛选出高产漆酶菌株对实现木质素的降解至关重要。请回答下列问题:
液体培养基:以木质素为唯一碳源。
固体培养基:主要成分有马铃薯浸出液、葡萄糖、琼脂、愈创木酚(漆酶可将其催化成一种红褐色物质)
(1)研究人员从不同环境地表上采集土壤、腐烂的树枝等接种到液体培养基,在28℃条件下摇床培养。
①液体培养基常采用 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌。摇床培养的目的是 增加溶液中的氧气以满足菌株的细胞呼吸的需求,使菌株与溶液成分接触更均匀增加溶液中的氧气以满足菌株的细胞呼吸的需求,使菌株与溶液成分接触更均匀。
②取培养液1mL采用 稀释涂布平板法稀释涂布平板法接种于固体选择培养基于28℃恒温箱倒置培养。实验结果见图。

选择菌落 菌落C菌落C作为高产漆酶菌株,理由是 菌落A周围没有出现红褐色圈,说明不能分泌漆酶;菌落B、C周围均出现红褐色圈且大小相似,但由于菌落C直径小于菌落B,说明菌落C分泌的漆酶数量多和活性强,因此选择菌落C菌落A周围没有出现红褐色圈,说明不能分泌漆酶;菌落B、C周围均出现红褐色圈且大小相似,但由于菌落C直径小于菌落B,说明菌落C分泌的漆酶数量多和活性强,因此选择菌落C。
(2)实际生产中,通过培养白腐真菌获取的漆酶蛋白往往与其它物质混合在一起。因此,得到漆酶的粗提取物后,先要通过 透析透析和 凝胶色谱法凝胶色谱法法进行纯化,再通过 电泳电泳鉴定漆酶的纯度。
(3)游离的漆酶稳定性差,在环境中易受温度、pH等因素的影响,且不易分离和回收,这在一定程度上限制了漆酶的工业化应用。请根据所学知识提出一项解决措施:利用固定化技术固定白腐真菌细胞(或固定漆酶)利用固定化技术固定白腐真菌细胞(或固定漆酶)。
【考点】微生物的选择培养和计数;酶的特性及应用.
【答案】高压蒸汽灭菌;增加溶液中的氧气以满足菌株的细胞呼吸的需求,使菌株与溶液成分接触更均匀;稀释涂布平板法;菌落C;菌落A周围没有出现红褐色圈,说明不能分泌漆酶;菌落B、C周围均出现红褐色圈且大小相似,但由于菌落C直径小于菌落B,说明菌落C分泌的漆酶数量多和活性强,因此选择菌落C;透析;凝胶色谱法;电泳;利用固定化技术固定白腐真菌细胞(或固定漆酶)
【解答】
【点评】
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