胰蛋白酶抑制剂（TI）可抑制昆虫蛋白酶活性，阻碍昆虫消化蛋白质。盐藻是一种无细胞壁的单细胞真核绿藻，是能在高盐条件下生长的新型生物反应器。研究人员利用基因工程技术构建TI基因的表达载体，并将其导入盐藻细胞中，进行了一系列实验。回答下列问题：
（1）研究人员利用PCR技术特异性地扩增目的基因的前提是需要 一段已知目的基因的核苷酸序列一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物。PCR过程中温度的控制至关重要，将处理温度控制在90～95℃，是为了 使DNA解链使DNA解链。
（2）获取目的基因后，为了构建基因表达载体，还需要使用的酶是 限制酶、DNA连接酶限制酶、DNA连接酶（答出2种）。构建成功的基因表达载体应含有的结构有目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点终止子、标记基因、复制原点（答出3种）等结构。
（3）研究人员将TI基因导入受体细胞后进行了检测，相关步骤和实验结果如表所示。该检测方法依据的原理是 抗原和抗体的特异性识别与结合抗原和抗体的特异性识别与结合。据表分析，该实验结果说明 TI基因在转基因盐藻细胞内成功表达TI基因在转基因盐藻细胞内成功表达。
| 组别 | 实验步骤 | 实验结果 | ||
| ① | ② | ③ | ||
| 转基因盐藻（A组） | 离心收集三组细 胞制备可溶性蛋 白质样品 |
将TI注射到大白 兔体内，获取TI 抗体 |
让TI抗体和样品 进行混合检测 |
有杂交带 |
| 非转基因盐藻（B组） | 无杂交带 | |||
| 阳性对照组（C组） | 有杂交带 | |||
【考点】基因工程的操作过程综合；DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】一段已知目的基因的核苷酸序列；使DNA解链；限制酶、DNA连接酶；终止子、标记基因、复制原点；抗原和抗体的特异性识别与结合；TI基因在转基因盐藻细胞内成功表达
【解答】
【点评】
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发布：2024/11/3 15:30:2组卷：6引用：4难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
