胰岛素A、B链分别表达法是生成胰岛素的方法之一，图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程（融合蛋白A、B分别表示β-半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白），请回答下列问题：
（1）图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是终止子终止子．
（2）图1中启动子是RNA聚合RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达，氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来．
（3）构建基因表达载体时必需的工具酶有限制酶和DNA连接酶限制酶和DNA连接酶．
（4）β-半乳糖苷酶与胰岛素A链或B链融合表达，可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏在内部，其意义在于防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解．
（5）溴化氰能切断肽链中甲硫氨酸羧基端的肽键，用溴化氰处理相应的融合蛋白能获得完整的A链或B链，且β-半乳糖苷酸被切成多个肽段，这是因为β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸．
（6）根据图2中胰岛素的结构，请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量，你得推测结果是至少2个至少2个，理由是两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基．
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】终止子；RNA聚合；作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出来；限制酶和DNA连接酶；防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解；β-半乳糖苷酶中含有多个甲硫氨酸，而胰岛素的A、B链中不含甲硫氨酸；至少2个；两条肽链的一端各有一个游离的氨基，氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：743引用：10难度：0.3
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
