我国在国际上首次明确了病毒mRNA“加帽”后形成成熟mRNA的关键酶分子，并且该分子在各突变株中高度保守，在人体中没有同源物，为发展新型、安全的广谱抗病毒药物提供了全新靶点，为优化针对“加帽”分子的抗病毒药物提供了关键科学依据。
（1）SARS-CoV-2在呼吸道黏膜上皮细胞内合成的mRNA“加帽”成熟需要的关键酶分子是 RNA聚合酶RNA聚合酶，如果以该酶分子为靶点找到了相应的抗体，区别于一般药物治疗更具优越性，理由是 关键酶分子高度保守，在人体中没有同源物关键酶分子高度保守，在人体中没有同源物。
（2）加端PCR是使扩增产物的末端加上一段DNA顺序的PCR，加端PCR的引物被设计成除与模板配对的那一部分以外再加上若干碱基，以便能使扩增产物的末端加上额外的一段DNA。科研人员首先获取了“加帽”关键酶分子抗体的mRNA经逆转录获得cDNA（互补的DNA链）。
①采用PCR技术对cDNA扩增了n代，则第n代共需要引物 2n-12n-1个。
②构建基因表达载体时，为了使目的基因的两端与质粒相应位置具有相同的限制酶切割位点，据表格和图分析，在PCR扩增“加帽”关键酶分子抗体基因时设计的引物末端需要加上的最佳额外DNA序列是 5'GGATCC5'GGATCC和 5'AAGCTT5'AAGCTT。
| 酶 | BamHⅠ | SacⅠ | HindⅢ | XbaⅠ |
| 识别序列 | 5′GGATCC | 5′GAGCTC | 5′AAGCTT | 5′TCTAGA |
B淋巴细胞
B淋巴细胞
细胞与骨髓瘤细胞混合培养，融合后最终筛选出具有 既能无限增殖又能分泌特异性抗体
既能无限增殖又能分泌特异性抗体
特点的细胞进行体内或体外培养制备抗体。单克隆抗体的优点是 特异性强、灵敏度高、可大量制备
特异性强、灵敏度高、可大量制备
。【考点】单克隆抗体及其应用．
【答案】RNA聚合酶；关键酶分子高度保守，在人体中没有同源物；2n-1；5'GGATCC；5'AAGCTT；B淋巴细胞；既能无限增殖又能分泌特异性抗体；特异性强、灵敏度高、可大量制备
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：32引用：2难度：0.6
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1．CD47是一种跨膜糖蛋白，它可与巨噬细胞表面的信号调节蛋白结合，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致吞噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。科学家推测，抗CD47的单克隆抗体可以解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，为此他们按照如图流程进行了实验。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：7引用：3难度：0.6 -
2．使用高效的细胞毒素药物进行化疗可以有效杀伤肿瘤细胞但细胞毒素没有特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时还会对健康细胞造成伤害。这限制了它在临床上的应用。抗体一药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，它的作用机制如图所示。下列叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/31 3:30:1组卷：18引用：2难度：0.7 -
3．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。图1是某双特异性抗体作用图。图2是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）与植物体细胞杂交相比，图2中过程②特有的诱导融合的方法是，过程②选用的骨髓瘤细胞（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行和，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是（答出一点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是。图2方框内需要经过次筛选，才能获取单克隆杂交—杂交瘤细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是。发布：2024/12/31 1:30:1组卷：21引用：4难度：0.5
