蓝细菌中的ictB蛋白能高效转运和浓缩CO2从而提高细胞光合速率,我国科学家构建了叶片特异性启动子Cab(叶绿体捕光色素蛋白Cab基因启动子)驱动的蓝细菌ictB基因表达载体,并通过农杆菌转化法获得了转ictB基因水稻,大大提高了水稻的产量。在ictB基因载体的构建中,含Cab启动子和ictB基因的重组DNA分子和Ti质粒的酶切位点如图1所示。请回答下列问题:

(1)为使重组DNA分子能定向插入T-DNA中,可用PCR的方法在重组DNA分子两端添加限制酶识别序列,据图可知,M端添加的序列所对应的限制酶是 BglⅠBglⅠ,N端添加的序列所对应的限制酶是 EcoRVEcoRV。经过酶切的重组DNA分子和Ti质粒进行连接时,可选用 DNA连接酶DNA连接酶(填“E.coli DNA连接酶”或“DNA连接酶”)。添加了限制酶识别序列的重组DNA分子与Ti质粒的重组过程共需要 44种酶。
(2)将农杆菌液浸泡过的水稻愈伤组织进行植物组织培养,培养基中需加入 潮霉素潮霉素进行筛选,最终获得多个水稻株系a1、a2、a3、a1。对a1~a1四个水稻株系的ictB蛋白表达量进行测定,结果如图2,其中a4株系ictB蛋白表达量较低的原因可能是 a4水稻株系中目的基因未表达a4水稻株系中目的基因未表达,检测应选用的植物器官是 叶片叶片,原因是 Cab启动子是叶片特异性启动子,它使ictB基因只能选择性的在叶片中表达Cab启动子是叶片特异性启动子,它使ictB基因只能选择性的在叶片中表达。

【考点】植物的组织培养.
【答案】BglⅠ;EcoRV;DNA连接酶;4;潮霉素;a4水稻株系中目的基因未表达;叶片;Cab启动子是叶片特异性启动子,它使ictB基因只能选择性的在叶片中表达
【解答】
【点评】
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发布:2024/11/24 17:0:1组卷:10引用:2难度:0.7
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