干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白,具有抑制细胞分裂、调节免疫、抗病毒,抗肿瘤等多种作用,是一种抗病毒的特效药。
我国科学家采用基因工程技术生产干扰素。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分离,反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨苄青霉素抗性基因的质粒PBR322和干扰素基因进行双酶切,然后用连接酶连接构成重组DNA.在一定条件下将重组载体DNA分子导入大肠杆菌,在培养基中筛选培养,检测干扰素的表达量,选出高效表达的工程菌。请回答下列问题:

(1)反转录得到的干扰素基因是一种cDNAcDNA。与人体细胞内的干扰素基因相比,它没有启动子和内含子启动子和内含子 等结构。
(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建基因表达载体的构建。已知酶A、酶B、酶C产生的黏性末端都不相同,质粒PBR322和干扰素基因进行酶切时,应选择的两种限制酶是酶B和酶C酶B和酶C。与单酶切相比,使用双酶切的优点是可以防止自身环化和反向连接可以防止自身环化和反向连接。
(3)在利用基因工程技术制备干扰素的过程中,受体菌除了大肠杆菌外,还可以用酵母菌作为受体菌,这两种受体菌生产的干扰素在结构上存在一定区别的原因是酵母菌有内质网和高尔基体,生产的干扰素为糖蛋白,而大肠杆菌没有内质网和高尔基体,不能对干扰素的进行相应的加工酵母菌有内质网和高尔基体,生产的干扰素为糖蛋白,而大肠杆菌没有内质网和高尔基体,不能对干扰素的进行相应的加工。
(4)干扰素在体外保存非常困难,如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸,在-70℃条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对(干扰素)基因(干扰素)基因 进行修饰或改造,这属于蛋白质蛋白质 工程的范畴。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】cDNA;启动子和内含子;基因表达载体的构建;酶B和酶C;可以防止自身环化和反向连接;酵母菌有内质网和高尔基体,生产的干扰素为糖蛋白,而大肠杆菌没有内质网和高尔基体,不能对干扰素的进行相应的加工;(干扰素)基因;蛋白质
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:9引用:2难度:0.7
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