先锋植物是指能在严重缺乏土壤、水分的荒漠化地区生长的植物。科学家利用有关限制酶（表中“↓”处表示限制酶作用位点）、耐干旱基因（图1）、质粒（图2）培育某种先锋植物。已知以DNA为模板合成子链DNA或 mRNA时，都是从引物的3'端进行延伸。回答下列问题：

限制酶	BamHⅠ	Sau3AⅠ	BclⅠ	EcoRⅠ
识别序列	-G↓GATCC-	-↓GATC-	-T↓GATCA-	-G↓AATTC-

（1）用PCR技术扩增耐干旱基因时，需选用引物

B、C

B、C

（字母“A、B、C、D”中选），在扩增过程中，进行冷却后，温度又升至70-75℃的目的是

有利于耐高温DNA聚合酶（或Taq酶）从引物起始进行互补链的合成

有利于耐高温DNA聚合酶（或Taq酶）从引物起始进行互补链的合成

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（2）图1、图2中，为利于耐干旱基因的定向插入和减少随意连接，需要用上表中的限制酶

EcoRⅠ和BamHⅠ

EcoRⅠ和BamHⅠ

处理含耐干旱基因的DNA片段，同时还需要用限制酶

EcoRⅠ和BclⅠ

EcoRⅠ和BclⅠ

处理质粒。
（3）基因表达载体构建后，需要把

①④

①④

（填写图2中数字序号）之间的碱基序列转移到先锋植物细胞中，这利用了农杆菌Ti质粒上T-DNA

可转移并整合到受体细胞染色体DNA上

可转移并整合到受体细胞染色体DNA上

的特性。
（4）将耐干旱基因导入先锋植物后，还需要进行检测与鉴定。请设计一个简单实验方案，以检测耐干旱基因是否翻译为蛋白质（简要叙述实验思路）

从导入耐干旱基因的先锋植物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交

从导入耐干旱基因的先锋植物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交

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