生态文明建设已成为我国的基本国策。水中雌激素类物质（E物质）污染会导致鱼类雌性化等异常，并通过食物链影响人体健康和生态安全。原产南亚的斑马鱼，其肌细胞、生殖细胞等存在E物质受体，且幼体透明。科学家将绿色荧光蛋白（GFP）等基因转入斑马鱼，建立了一种经济且快速的水体E物质监测方法。
（1）将表达载体导入斑马鱼受精卵的最佳方式是

显微注射

显微注射

。
（2）为监测E物质，研究者设计了如图所示的两种方案制备转基因斑马鱼，其中ERE和酵母来源的UAS是两种诱导型启动子，分别被E物质-受体复合物和酵母来源的Gal4蛋白特异性激活，启动下游基因表达。

与方案1相比，方案2的主要优势是

监测灵敏度更高

监测灵敏度更高

，因而被用于制备监测鱼（MO）。
现拟制备一种不育的监测鱼SM，用于实际监测。SM需经MO和另一亲本（X）杂交获得。欲获得X，需从以下选项中选择启动子和基因，构建表达载体并转入野生型斑马鱼受精卵，经培育后进行筛选。请将选项的序号填入相应的方框中。
Ⅰ．启动子：

①

①

。
①UAS
②ERE
③使基因仅在肌细胞表达的启动子（P肌）
④使基因仅在生殖细胞表达的启动子（P生）
Ⅱ．基因：

C

C

。
A．Gal4
B．GFP
C．仅导致生殖细胞凋亡的基因（dg）
D．雌激素受体基因（ER）
（3）SM不育的原因是：成体SM自身产生雌激素，与受体结合后

激活ERE诱导Gal4表达，Gal4结合UAS诱导dg表达，生殖细胞凋亡

激活ERE诱导Gal4表达，Gal4结合UAS诱导dg表达，生殖细胞凋亡

造成不育。
（4）使拟用于实际监测的SM不育的目的是

避免转基因斑马鱼逃逸带来生物安全问题

避免转基因斑马鱼逃逸带来生物安全问题

。