通过基因工程技术能大量生产人生长激素。图1所示为人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，是由三种质粒经复杂重组过程而构建。其上含氨苄青霉素抗性基因（Ampr ）、四环素抗性基因（Tett）。图2为相关限制酶的识别序列和酶切位点。请回答下列问题：
（1）人工构建pBR322质粒需要的酶有 限制酶、DNA连接酶限制酶、DNA连接酶。
（2）生产生长激素需从人垂体细胞中提取mRNA，逆转录得到DNA，以该DNA为 模板模板进行大量复制，获得 相应的目的基因。
（3）为了构建重组质粒，采用Pst I、EcoR I处理目的基因和质粒，与只用Pst I处理相比，这样操作的优势是：用PstⅠ、EcoRⅠ处理目的基因和质粒，因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因（环化）、质粒—质粒（环化）等错误连接形式（避免产生错误连接方式即给分）用PstⅠ、EcoRⅠ处理目的基因和质粒，因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因（环化）、质粒—质粒（环化）等错误连接形式（避免产生错误连接方式即给分）。将构建的重组质粒导入大肠杆菌后，为了排除普通大肠杆菌（无pBR322质粒）、空质粒大肠杆菌（含pBR322质粒但没有目的基因）的干扰，进行了进一步检测。配制甲、乙两种培养基，甲培养基含四环素，乙培养基含四环素和氨苄青霉素。含目的基因的大肠杆菌在甲培养基上 能能（填“能”或“不能”）生存，在乙培养基上
不能不能（填“能”或“不能”）生存。
（4）导入受体细胞后，常用 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交技术检测生长激素 在大肠杆菌中是否成功表达。
（5）基因工程的应用十分广阔，可用转基因牛制作乳腺生物反应器，从乳汁中提取药物，则该操作过程中选择的受体细胞是 牛的受精卵牛的受精卵，原因是 动物受精卵具有全能性（动物不能像植物那样，利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体）动物受精卵具有全能性（动物不能像植物那样，利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体）。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】限制酶、DNA连接酶；模板；用PstⅠ、EcoRⅠ处理目的基因和质粒，因形成的黏性末端不同可避免目的基因—目的基因（环化）、质粒—质粒（环化）等错误连接形式（避免产生错误连接方式即给分）；能；不能；抗原-抗体杂交；牛的受精卵；动物受精卵具有全能性（动物不能像植物那样，利用一个除受精卵以外的独立的体细胞直接培养成完整的个体）
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：19引用：2难度：0.6
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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