科研人员通过敲除里氏木霉基因组中去乙酰化酶基因（HDAC），探究组蛋白乙酰化对纤维素酶基因表达的影响，其主要过程如图1。请据图回答问题。
（1）PCR反应体系中，除加入引物和模板DNA外，一般还需要加入 Taq酶、dNTP（缓冲液、Mg2+）等Taq酶、dNTP（缓冲液、Mg2+）等。在最后一个循环结束后通常还需要维持72℃7min,其目的是 使子链充分延伸（或充分反应，获得更多的完整目的片段，或获得更多的完整目的片段）使子链充分延伸（或充分反应，获得更多的完整目的片段，或获得更多的完整目的片段）。
（2）引物设计是PCR的关键，本研究中引物R1的5'端添加与引物Fc互补的序列，其目的是 便于H1和GR拼接（便于PCR4时形成H1-GR融合基因）便于H1和GR拼接（便于PCR4时形成H1-GR融合基因）。在PCR5中加入的引物是 R2和FGR2和FG。
（3）在原生质体转化过程中，加入适量的CaCl2和PEG溶液，其目的是 促进外源DNA分子进入原生质体（或使原生质体变成感受态）促进外源DNA分子进入原生质体（或使原生质体变成感受态）。涂布时，涂布器用 灼烧灭菌（或酒精引燃）灼烧灭菌（或酒精引燃）法灭菌后将原生质体接种到含 新霉素新霉素的固体培养基上筛选。
（4）为探究敲除基因HDAG后对纤维素酶基因（CBHI、EGLI）和纤维素酶基因激活因子基因XYR1转录的影响，研究中先提取 （培养到第5天的）两类菌株细胞的总RNA（或总RNA）（培养到第5天的）两类菌株细胞的总RNA（或总RNA），再利用荧光RT-PCR技术检测，结果如图2。依据结果可以得出的结论是 敲除基因HDAC使细胞中组蛋白去乙酰化酶缺乏，细胞中组蛋白乙酰化程度高，可以显著提高纤维素酶基因的表达敲除基因HDAC使细胞中组蛋白去乙酰化酶缺乏，细胞中组蛋白乙酰化程度高，可以显著提高纤维素酶基因的表达。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】Taq酶、dNTP（缓冲液、Mg2+）等；使子链充分延伸（或充分反应，获得更多的完整目的片段，或获得更多的完整目的片段）；便于H1和GR拼接（便于PCR4时形成H1-GR融合基因）；R2和FG；促进外源DNA分子进入原生质体（或使原生质体变成感受态）；灼烧灭菌（或酒精引燃）；新霉素；（培养到第5天的）两类菌株细胞的总RNA（或总RNA）；敲除基因HDAC使细胞中组蛋白去乙酰化酶缺乏，细胞中组蛋白乙酰化程度高，可以显著提高纤维素酶基因的表达
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：33引用：2难度：0.7
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
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（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
