蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法，培育转基因蜘蛛羊。目前，基因工程中使用的限制酶主要是从原核生物中分离纯化获得的。含有限制酶的细胞通常还具有相应的甲基化酶，它可对自身DNA进行甲基化修饰。请根据资料和图解回答下列问题：
（1）原核细胞中的限制酶可切割外源DNA，但不破坏自身DNA，其原因可能是
①细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列；
②甲基化酶对细胞自身的DNA进行甲基化修饰，限制酶无法识别修饰后的DNA序列甲基化酶对细胞自身的DNA进行甲基化修饰，限制酶无法识别修饰后的DNA序列。
（2）如图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图。
则与之对应的引物结合部位应该是图中的 2、32、3（填数字）；PCR过程中，若一个蛛丝蛋白基因扩增了4次，则消耗了引物 1414个，所得DNA中含有其中一种引物的共 66个。
（3）若想在蜘蛛羊乳汁中提取所需要的蛛丝蛋白，可以通过①过程将蛛丝蛋白基因和乳腺中特异表达特异表达的基因的 启动子启动子等调控元件重组在一起，该调控元件上有 RNA聚合RNA聚合酶结合位点。通过 显微注射法显微注射法的方法导入山羊的 受精卵受精卵中培育成蜘蛛羊，这样就可以在蜘蛛羊的乳汁中提取蛛丝蛋白，这称为 乳腺生物反应器乳腺生物反应器。
（4）目的基因导入受体后，进行了PCR检测结果如图（1号来自普通山羊，2号是含蛛丝蛋白基因的质粒，3～8号来自转基因山羊），从结果可以看出，3、5、83、5、8号山羊含有蛛丝蛋白基因。若这些成功导入目的基因的转基因蜘蛛羊并没有产生相应的蛛丝蛋白，根据中心法则分析，其可能的原因是 蛛丝蛋白基因没有转录或转录的mRNA没有翻译蛛丝蛋白基因没有转录或转录的mRNA没有翻译。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列；甲基化酶对细胞自身的DNA进行甲基化修饰，限制酶无法识别修饰后的DNA序列；2、3；14；6；特异表达；启动子；RNA聚合；显微注射法；受精卵；乳腺生物反应器；3、5、8；蛛丝蛋白基因没有转录或转录的mRNA没有翻译
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：12引用：4难度：0.7
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
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