猪血红蛋白位于猪红细胞内，含有4条肽链。以下是分离及提取猪血红蛋白的过程，回答下列问题：
（1）在新鲜的猪血中加入按125：1配成的0.85%NaCl溶液（生理盐水）和40%柠檬酸钠，混合液，此混合液的作用是维持红细胞的形态，防止血液凝固维持红细胞的形态，防止血液凝固。然后离心，弃去血清。再用生理盐水洗涤三次，用以除去杂蛋白。
（2）向盛有洗涤好的猪红细胞的烧杯中加入蒸馏水可释放血红蛋白，原理是红细胞在蒸馏水中吸水涨破，释放血红蛋白红细胞在蒸馏水中吸水涨破，释放血红蛋白。加入饱和（NH4）2SO4溶液后，发现有红色沉淀析出，这个过程称为盐析盐析。经过滤可得到猪血红蛋白的粗蛋白。
（3）将猪血红蛋白的粗蛋白溶解在磷酸缓冲液中，用凝胶色谱柱层析纯化。磷酸缓冲液的作用是有利于维持蛋白质的结构和功能有利于维持蛋白质的结构和功能凝胶色谱法分离猪血红蛋白的原理是分子量较大蛋白质通过凝胶颗粒的间隙，路程较短，移动速度较快，先洗脱出来；分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢，后洗脱出来分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢，后洗脱出来。
（4 ）将凝胶色谱柱层析纯化得到的猪血红蛋白用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离。SDS有强电荷，能覆盖蛋白质上的电荷，并使猪血红蛋白解聚为4条肽链。因此，电泳时蛋白质的迁移率完全取于分子分子量分子量。如图是电泳结果，结果表明分离得到的猪血红蛋白纯度较高，判断依据是电泳后只有一个条带电泳后只有一个条带，猪血红蛋白的分子量约为64KDa64KDa。
【考点】蛋白质的结构和功能的综合．
【答案】维持红细胞的形态，防止血液凝固；红细胞在蒸馏水中吸水涨破，释放血红蛋白；盐析；有利于维持蛋白质的结构和功能；分子量较小的蛋白质容易进入凝胶内部通道，路程较长，移动速度较慢，后洗脱出来；分子量；电泳后只有一个条带；64KDa
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：38引用：1难度：0.7
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