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金属硫蛋白(MT)属于重金属结合蛋白,能够吸收土壤中的镉,蚯蚓的体内富含MT,可通过基因工程技术将蚯蚓MT基因转人烟草中,使烟草获得结合重金属的能力。回答下列问题:
(1)获取MT基因:从蚯蚓组织中提取mRNA,用于构建
cDNA
cDNA
文库。
(2)构建基因表达载体:用两种不同限制酶切割质粒与目的基因的目的是
防止酶切产物自身相连或反向相连
防止酶切产物自身相连或反向相连
(答出1点即可)。
(3)导入受体细胞:烟草为双子叶植物,科研人员常用
农杆菌转化
农杆菌转化
法将基因表达载体导入受体细胞,利用该方法可使目的基因在受体细胞中得以稳定维持和表达的机制是
农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上
农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上

(4)目的基因的鉴定:个体水平对目的基因是否翻译出具有功能的蛋白质进行鉴定的方法是
将已导入蚯蚓MT基因的烟草种植在富含镉的土壤中,检测土壤中镉含量变化
将已导入蚯蚓MT基因的烟草种植在富含镉的土壤中,检测土壤中镉含量变化

(5)利用转基因烟草修复重金属镉污染土壤的优点有
无二次污染,可以回收重金属
无二次污染,可以回收重金属
(答出2点即可)。

【答案】cDNA;防止酶切产物自身相连或反向相连;农杆菌转化;农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上;将已导入蚯蚓MT基因的烟草种植在富含镉的土壤中,检测土壤中镉含量变化;无二次污染,可以回收重金属
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:8引用:2难度:0.7
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    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
     
     

    (2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
     
    。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是
     
    。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的
     

    (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
     
     
    ,其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是
     
    。当几丁质酶基因和质粒载体连接时,DNA连接酶催化形成的化学键是
     

    (4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
     

    (5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是
     

    发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6
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