科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产植株,通过基因测序发现该高产植株控制青蒿素合成的一种关键酶的基因发生了突变。请回答下列相关问题:
(1)提取了高产植株的全部DNA后,要想快速大量获得该突变基因可以采用PCR技术,该技术的原理是 DNA复制DNA复制,前提是必须知道该基因的部分核苷酸序列,以便根据这一序列设计合成 引物引物。
(2)如果用青蒿某个时期总RNA逆转录产生的cDNA片段与载体连接后,储存在一个受体菌群中,这个受体菌群就叫做青蒿的 cDNA文库cDNA文库。这些cDNA与青蒿细胞中对应基因的碱基序列 不同不同(填“相同”或“不同”)。
(3)将获得的突变基因导入普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:
用图1中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能使用SmaⅠ切割的原因是 SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、SmaⅠ会破坏外源DNA中的目的基因SmaⅠ会破坏外源DNA中的目的基因。用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶比EcoRⅠ一种限制酶构建基因表达载体的优点是 防止目的基因自我环化防止目的基因自我环化、防止目的基因与质粒反向连接防止目的基因与质粒反向连接。用构建好的重组质粒在其目的基因前要加上特殊的启动子,启动子是 RNA聚合酶的识别和结合位点RNA聚合酶的识别和结合位点。
(4)研究人员通常采用 农杆菌转化农杆菌转化法将该突变基因导入青蒿细胞内。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】DNA复制;引物;cDNA文库;不同;SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因;SmaⅠ会破坏外源DNA中的目的基因;防止目的基因自我环化;防止目的基因与质粒反向连接;RNA聚合酶的识别和结合位点;农杆菌转化
【解答】
【点评】
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