奶酪是一种常见的食品，传统的方法是从未断奶的小牛的胃黏膜里提取牛凝乳酶，它能水解多肽链中苯丙氨酸和甲硫氨酸之间的肽键以促使牛奶凝结来生产奶酪，此方法产量低且昂贵。如今科学家将编码牛凝乳酶的基因导入大肠杆菌中，实现牛凝乳酶的批量生产，极大的满足了奶酪生产的需求。请回答相关问题：
（1）科学家利用基因工程生产出大量的牛凝乳酶，该工程是在（DNA）分子（DNA）分子水平上进行设计和施工的，其核心步骤是基因表达载体的构建基因表达载体的构建。
（2）使大肠杆菌产生牛凝乳酶的目的基因最好从cDNA文库cDNA文库（cDNA文库/基因组文库）中获取，原因是大肠杆菌是原核生物，cDNA文库中没有内含子，基因结构与原核细胞的基因结构更接近大肠杆菌是原核生物，cDNA文库中没有内含子，基因结构与原核细胞的基因结构更接近。
（3）利用图示目的基因和质粒构建重组质粒，最好选用NcoI和XhoINcoI和XhoI（填限制性核酸内切酶名称）切割，理由是目的基因不会被破坏、防止目的基因或载体自身的黏性末端连接、防止目的基因与载体反向连接目的基因不会被破坏、防止目的基因或载体自身的黏性末端连接、防止目的基因与载体反向连接。若要初步筛选出导入重组质粒的大肠杆菌，要在含氨苄青霉素氨苄青霉素（氨苄青霉素/四环素）的培养基中进行培养。
（4）最后进行凝乳酶活性检测：将适量的大肠杆菌表达出的凝乳酶的提取物加入脱脂奶粉溶液中，37℃保温一段时间，可观察到脱脂奶粉溶液有明显的凝结脱脂奶粉溶液有明显的凝结现象。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】（DNA）分子；基因表达载体的构建；cDNA文库；大肠杆菌是原核生物，cDNA文库中没有内含子，基因结构与原核细胞的基因结构更接近；NcoI和XhoI；目的基因不会被破坏、防止目的基因或载体自身的黏性末端连接、防止目的基因与载体反向连接；氨苄青霉素；脱脂奶粉溶液有明显的凝结
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：61引用：6难度：0.7
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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