近年来，科学家利用基因工程技术创造出许多优良品种或产品。如图为获得抗除草剂转基因玉米的技术路线，其中含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。请回答以下问题：
（1）获得抗除草剂转基因玉米的过程中核心步骤是基因表达载体构建基因表达载体构建。
（2）为防止酶切产物自身环化，需使用22种限制酶，分别对含除草剂抗性基因G的DNA片段和Ti-质粒上的T-DNAT-DNA（填“报告基因”、“T-DNA”、“氨苄青霉素抗性基因”） 进行酶切。
（3）为提高转化成功率，常用含Ca2+Ca2+的溶液处理土壤农杆菌，使其成为感受态细胞。转化成功的农杆菌应在含氨苄青霉素氨苄青霉素的培养基上进行筛选1。
（4）农杆菌细胞内“报告基因”表达后不能不能（填“能”或“不能”）能催化无色物质K呈现蓝色，原因是报告基因中的内含子转录产生的RNA序列在农杆菌中不能被切除，导致农杆菌内“报告基因”翻译的蛋白质结构不同，不具相应的酶活性，无法催化无色物质K呈现蓝色报告基因中的内含子转录产生的RNA序列在农杆菌中不能被切除，导致农杆菌内“报告基因”翻译的蛋白质结构不同，不具相应的酶活性，无法催化无色物质K呈现蓝色。
（5）农杆菌转化愈伤组织的过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。所以进行过程筛选2时，应在培养基中加入除草剂和物质K除草剂和物质K，并挑选愈伤组织细胞内呈显蓝色愈伤组织细胞内呈显蓝色的植物细胞，进行植物组织培养植物组织培养获得抗除草剂转基因玉米幼苗。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】基因表达载体构建；2；T-DNA；Ca2+；氨苄青霉素；不能；报告基因中的内含子转录产生的RNA序列在农杆菌中不能被切除，导致农杆菌内“报告基因”翻译的蛋白质结构不同，不具相应的酶活性，无法催化无色物质K呈现蓝色；除草剂和物质K；愈伤组织细胞内呈显蓝色；植物组织培养
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：8引用：4难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
