盐分是限制植物生长发育的重要因素之一,科研人员尝试利用獐茅液泡膜Na+/K+逆向转运蛋白基因(AINHX基因)培育转基因耐盐马铃薯。
(1)通常从獐茅的 基因文库基因文库中获取AINHX基因用以构建基因表达载体,构建基因表达载体过程中使用的工具是 限制酶、DNA连接酶和运载体限制酶、DNA连接酶和运载体。
(2)为保证目的基因在马铃薯根细胞中能够正常表达,运载体上应含有特定的 启动子启动子。
(3)马铃薯的转化过程常用 农杆菌转化法农杆菌转化法,这种方法是利用了 农杆菌的Ti质粒农杆菌的Ti质粒上的T-DNA具有 可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上的特点。
(4)为探究目的基因整合到马铃薯基因组后是否转录,可从转基因植株的细胞中提取所有mRNA并反转录成cDNA,再利用 PCRPCR技术进行基因扩增,该技术的原理是 DNA双链复制DNA双链复制。若对1个基因扩增n代,则共需消耗 2n-12n-1对引物。
(5)为证明转基因马铃薯获得了耐盐性,将生长至4叶期的转基因幼苗转入 高浓度的NaCl高浓度的NaCl溶液中培养,30天后观察植株生长情况。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】基因文库;限制酶、DNA连接酶和运载体;启动子;农杆菌转化法;农杆菌的Ti质粒;可转移至受体细胞并整合到受体细胞的染色体DNA上;PCR;DNA双链复制;2n-1;高浓度的NaCl
【解答】
【点评】
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