新冠病毒是一类具有包膜的RNA病毒，会感染人类并引起呼吸综合征。应对传染性强的病毒感染，需要免疫效果持久的疫苗。最新研发的疫苗是核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）。图1为DNA疫苗制作流程，图2和图3分别为备选质粒和从病毒获得的抗原基因结构示意图。回答下列问题。
（1）基因表达载体需要具备复制原点复制原点才能在受体细胞中扩增。过程①中，如果利用PCR技术扩增抗原基因，在设计引物时需要在两种引物的一端分别加上HindⅢ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ两种限制酶的识别序列，以便重组质粒的构建。
（2）BanHⅠ限制酶的识别序列为六个碱基序列，且切割位点在G与G之间，产生的黏性末端是GATC-，则BanHⅠ的识别序列是
；已知Sau3AⅠ酶切的DNA末端与BanHⅠ酶的相同，两种酶切末端相连后不一定能不一定能（填“能”、“不能”或“不一定能“）被BanHⅠ酶识别。
（3）如果导入重组质粒的受体细胞同时具备标记基因①和标记基因②所决定的性状，试分析可能原因：不含目的基因质粒被导入受体细胞不含目的基因质粒被导入受体细胞。
（4）从疫苗成分的角度分析，DNA疫苗比蛋白疫苗对冷链运输要求低的原因是蛋白质的空间结构易受温度影响而DNA热稳定性高蛋白质的空间结构易受温度影响而DNA热稳定性高。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】复制原点；HindⅢ和PstⅠ；；不一定能；不含目的基因质粒被导入受体细胞；蛋白质的空间结构易受温度影响而DNA热稳定性高
；不一定能；不含目的基因质粒被导入受体细胞；蛋白质的空间结构易受温度影响而DNA热稳定性高【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：2难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
