科研人员克隆了猪白细胞抗原基因（SLA-2基因），构建了该基因的真核表达载体，进行了猪肾上皮细胞表达研究。实验的主要流程如图1，SLA-2基因长度为1100bp,质粒B的总长度为4445bp,其限制酶切点后的数字表示距复制原点的距离。请回答：
| 限制酶 | BclⅠ | NotⅠ | XbaⅠ | San3AⅠ |
| 识别序列及切割位点 | T↓GATCA | GC↓GGCCGC | T↓CTAGA | ↓GATC |
DNA复制
DNA复制
，下列4种引物中应选择的是 a、b
a、b
。a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）过程②将重组质粒导入大肠杆菌的目的是
扩增重组DNA分子
扩增重组DNA分子
，该过程需要用 Ca2+
Ca2+
处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。然后将大肠杆菌涂布在含有 氨苄青霉素
氨苄青霉素
（抗生素）的培养基上培养。（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切质粒C后电泳，请在答题纸相应位置画出可能得到的电泳条带。
（4）科研中常用嘌呤霉素对真核细胞进行筛选，一般选择最低致死浓度的前一个浓度作为筛选浓度的原因是：既可以让大部分没有抗性的细胞死亡又不会让
具有抗性的细胞死亡
具有抗性的细胞死亡
。实验结果如图2，根据实验结果最佳的嘌霉素筛选浓度为 80ug/mL
80ug/mL
。（5）过程⑦研究人员用小鼠抗SLA抗原肽单克隆抗体检测肾上皮细胞生产的抗原肽，其原理是
抗原-抗体杂交
抗原-抗体杂交
，单克隆抗体能检测其是否具有正确的 抗原肽
抗原肽
，从而是否具有生物活性。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定；单克隆抗体及其应用．
【答案】DNA复制；a、b；扩增重组DNA分子；Ca2+；氨苄青霉素；具有抗性的细胞死亡；80ug/mL；抗原-抗体杂交；抗原肽
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/15 6:30:1组卷：47引用：3难度：0.6
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1．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
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（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
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D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
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