2017年CAR-T疗法获批可用于癌症治疗。其核心是将具有肿瘤识别功能的CAR基因整合到人体T淋巴细胞，形成能准确定位并杀死癌细胞的CAR-T细胞，请回答下列问题：
（1）已知CAR基因的全部序列，科研人员通过人工合成人工合成法和PCR技术可获得大量该基因片段。在PCR反应体系中除模板外还需加入引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸。
（2）治疗基本过程是：分离患者T细胞并构建CAR-慢病毒运载体→体外基因转移形成CAR-T细胞→筛选、培养CAR-T细胞→输入患者体内，该疗法属于体外基因体外基因治疗，该运载体进入人体细胞的方式通常是胞吞胞吞。该方法采用的是自身T细胞，而不用异体T细胞，其原因是避免发生排斥反应避免发生排斥反应。
（3）为检查CAR基因能否在T细胞中翻译成蛋白质，可采用抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交法检测，CAR-T细胞培养基中通常需加入血清、血浆血清、血浆等天然成分，传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理后再进行分瓶培养。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】人工合成；引物、热稳定DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸；体外基因；胞吞；避免发生排斥反应；抗原-抗体杂交；血清、血浆；胰蛋白酶或胶原蛋白酶
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：11引用：1难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
